[发明专利]一种检测肺炎衣原体的试剂盒在审
申请号: | 201811643271.3 | 申请日: | 2018-12-29 |
公开(公告)号: | CN111378769A | 公开(公告)日: | 2020-07-07 |
发明(设计)人: | 迟大利;吴大治;夏懿 | 申请(专利权)人: | 上海星耀医学科技发展有限公司;上海复星长征医学科学有限公司 |
主分类号: | C12Q1/689 | 分类号: | C12Q1/689;C12Q1/6844;C12Q1/04;C12N15/11;C12R1/01 |
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地址: | 201315 上海*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 检测 肺炎 衣原体 试剂盒 | ||
1.一种用于肺炎衣原体的LAMP检测方法和反应体系。
2.一种肺炎衣原体的LAMP检测方法,主要包括以下步骤:以待测物的基因组DNA为模板,在权利要求1所述专用引物的引导下进行LAMP扩增,通过在反应液中添加SYBR GREEN,利用恒温扩增仪检测荧光曲线,有荧光曲线表示待测样品中存在肺炎衣原体、结果为阳性,无扩增曲线表示待测样品中无肺炎衣原体、结果为阴性。
3.根据权利要求2所述的检测方法,其特征在于:使用磁珠法对待测样本进行核酸提取;LAMP反应体系包括:待测物的基因组DNA 3μL,20mM Tris·HCl (pH8.8),10mM(NH4)2SO4,50mM KCl,2mM MgSO4,0.1% Tween20,1M Betaine,0.4mM dNTP each,8U Bst DNApolymerase,SYBR GREEN(1×DMSO PCR级),0.2μM F3,0.2μM B3,0.8μM FIP和0.8μM BIP。
4.根据权利要求2所述的检测方法,其特征在于LAMP扩增条件为:反应管置于58~68℃恒温反应15~60min,优选为63℃恒温反应30min。
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