[发明专利]一种通过荧光铜纳米簇探针检测儿茶酚胺及其浓度的方法、检测单胺氧化酶及其浓度的方法在审
申请号: | 201811644186.9 | 申请日: | 2018-12-30 |
公开(公告)号: | CN109557063A | 公开(公告)日: | 2019-04-02 |
发明(设计)人: | 姜英男;王新宇;辛精卫;刘宇昕;胡耀中;赵文学;张阳;孙天霞;刘美欣 | 申请(专利权)人: | 长春中医药大学 |
主分类号: | G01N21/64 | 分类号: | G01N21/64 |
代理公司: | 北京集佳知识产权代理有限公司 11227 | 代理人: | 赵青朵 |
地址: | 130000 吉林省*** | 国省代码: | 吉林;22 |
权利要求书: | 查看更多 | 说明书: | 查看更多 |
摘要: | |||
搜索关键词: | 儿茶酚胺 纳米簇 荧光 检测 单胺氧化酶 荧光法检测 发射荧光 光学材料 生物医学 探针检测 荧光发射 荧光纳米 荧光性质 灵敏度 尿液 探针 无创 制备 应用 血液 | ||
1.一种荧光铜纳米簇在荧光法检测儿茶酚胺和/或单胺氧化酶中的应用。
2.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述荧光法检测儿茶酚胺还包括荧光法检测儿茶酚胺的浓度;
所述荧光法检测儿茶酚胺的过程中,同时原位制备荧光铜纳米簇,所述原位制备的原料包括儿茶酚胺和单胺氧化酶;
所述荧光铜纳米簇的荧光发射强度与儿茶酚胺的浓度成正比;
所述儿茶酚胺的浓度为50~4000μM;
所述荧光铜纳米簇包括铜纳米簇和配体;
所述荧光铜纳米簇的粒径为1~5nm;
所述荧光法为非荧光淬灭法。
3.根据权利要求2所述的应用,其特征在于,所述荧光法检测单胺氧化酶还包括荧光法检测单胺氧化酶的浓度;
所述荧光法检测单胺氧化酶的过程中,同时原位制备荧光铜纳米簇,所述原位制备的原料包括单胺氧化酶和儿茶酚胺;
所述荧光铜纳米簇的荧光发射强度与单胺氧化酶的浓度成正比;
所述单胺氧化酶的浓度为50~4000μM;
所述配体为聚丙烯酸;
所述铜纳米簇和配体的摩尔比为1:(0.2~4.8)。
4.一种采用荧光铜纳米簇荧光法检测儿茶酚胺浓度的方法,其特征在于,包括以下步骤:
1)将儿茶酚胺溶液和单胺氧化酶溶液混合温育后,得到混合溶液;
2)将上述步骤得到的混合溶液、酸性缓冲液、丙烯酸和还原剂进行反应后,得到反应液;
3)将上述步骤得到的反应液、第二酸性缓冲液和可溶性铜源进行微波反应后,得到具有荧光强度的铜纳米簇溶液;
4)采用不同浓度的儿茶酚胺溶液重复上述步骤1)~3),得到具有不同荧光强度的铜纳米簇溶液;
5)建立铜纳米簇的荧光强度的数值与儿茶酚胺浓度的定量关系,用于检测待测样品中的儿茶酚胺浓度。
5.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,所述单胺氧化酶溶液的浓度为0.5~2mg/mL;
所述儿茶酚胺溶液与所述单胺氧化酶溶液的体积比为(35~40):(1~5);
所述温育的温度为40~45℃;
所述温育的时间为2~3h;
所述酸性缓冲液包括磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液、柠檬酸-氢氧化钠-盐酸缓冲液、乙酸-乙酸钠缓冲溶液和磷酸氢二钠-磷酸二氢钾缓冲液一种或多种;
所述酸性缓冲液的pH值为3.5~6.2;
所述酸性缓冲液的浓度为0.5~2mM;
所述儿茶酚胺溶液与所述酸性缓冲液的体积比为(35~40):(1~5)。
6.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,所述儿茶酚胺溶液与所述丙烯酸的体积比为(35~40):(1~4);
所述丙烯酸的浓度为20~60mM;
所述还原剂包括NaHSO3溶液、Na2SO3溶液、Na2S2O3溶液、草酸、葡萄糖溶液、醇溶液和胺溶液中的一种或多种;
所述还原剂的浓度为30~70mM;
所述儿茶酚胺溶液与所述还原剂的体积比为(35~40):(0.1~1);
所述反应的时间为10~120min;
所述反应后还包括透析步骤;
所述透析的透析膜的分子量为500~1500Da;
所述透析的时间为12~24h。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息,商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于长春中医药大学,未经长春中医药大学许可,擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作,请联系【客服】
本文链接:http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201811644186.9/1.html,转载请声明来源钻瓜专利网。
- 一种稳定和富集生物介质中儿茶酚胺的方法
- 儿茶酚胺免疫原、衍生物及合成方法、特异性抗体和检测试剂及制备方法
- 儿茶酚胺产生促进剂,起因于儿茶酚胺的缺乏的疾病的治疗药/预防药
- 毛细管电泳结合UPLC-MS分析PQQ对儿茶酚胺神经递质调节作用的研究方法
- 用于检测儿茶酚胺的SERS活性微针及其使用方法
- 一种通过荧光铜纳米簇探针检测儿茶酚胺及其浓度的方法、检测单胺氧化酶及其浓度的方法
- 富胺基儿茶酚胺化合物及其制备方法、富胺基表面改性产品、材料及其浸涂方法
- 一种儿茶酚胺的LC-MS/MS检测方法及预处理试剂盒
- 一种自支撑儿茶酚胺薄膜及其制备方法与应用
- 一种儿茶酚胺类改性纤维素类材料及其制备方法和在滤膜中的应用