[发明专利]一种适用于生殖道病原菌检测的非冻型尿液DNA保存液有效
申请号: | 201811647751.7 | 申请日: | 2018-12-29 |
公开(公告)号: | CN109750029B | 公开(公告)日: | 2022-08-09 |
发明(设计)人: | 朱兴彪;葛毅媛;管亚伟;谢龙旭;王博;徐爱娟 | 申请(专利权)人: | 广州凯普生物科技有限公司;广州凯普医药科技有限公司;潮州凯普生物化学有限公司 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10 |
代理公司: | 广州粤高专利商标代理有限公司 44102 | 代理人: | 任重 |
地址: | 510000 广东省广州市黄*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 适用于 生殖 病原菌 检测 非冻型 尿液 dna 保存 | ||
本发明公开了一种适用于生殖道病原菌检测的非冻型尿液DNA保存液。该保存液由乙二胺四乙酸二钠(EDTA.Na2)、Tris‑HCl、亚硫酸氢钠、Proclin300组成。该保存液成分安全可靠,可在常温条件下保存尿液,保存条件温和,无需严格限制保存温度,常温即可;使用简单,直接把新鲜的尿液样品与本产品混合即可;而且保存时间长达6个月,在6个月内高效、长期保整DNA的完整性;提取纯化后DNA的长度在20~50 Kb之间,DNA无化学修饰;被保存的尿液非常适用于提取DNA用于生殖道病原菌的检测,具有很好的应用价值和推广前景。
技术领域
本发明属于生物化学技术领域。更具体地,涉及一种适用于生殖道病原菌检测的非冻型尿液DNA保存液。
背景技术
尿液检查是医学的一种检测方式,因其获取简便、收集无创和可提供大量生理变化发展进程的信息,被临床广泛运用。尿液中存在许多潜在的生物标记物,包括代谢物质、细胞、蛋白、核酸等。这些生物标记物在检测药品的安全性、监测急慢性肾脏疾病和其他泌尿道感染等情况上具有突出的作用。
尿液是一种不稳定的物质,一经排出就会发生某些化学变化。为了发现新的生物标记物以及分析这些生物标记物的特异性和灵敏度,除了依靠高精密的现代化仪器和技术(蛋白组学、多肽组学、脂质组学、代谢组学),高质量的样本更是必不可少,建立高质量的尿液标本保存体系是开展代谢性疾病、病原菌感染等重大疾病的重要环节。
现有针对该问题主要是加入特定的化学防腐剂,同时冷藏保存。现有的尿液保存液各有优缺点,存在保存效果欠佳、含对人体有害的物质、成分复杂、适用范围差异化等问题。
发明内容
本发明要解决的技术问题是克服现有尿液保存液的缺陷和不足,提供一种可在常温条件下保存尿液的保存液,可在常温下保存尿液中脱落细胞DNA的完整,被保存的尿液非常适用于提取DNA用于生殖道病原菌的检测。
本发明目的是提供一种适于生殖道病原菌检测的非冻型尿液DNA保存液。
本发明上述目的通过以下技术方案实现:
一种适用于生殖道病原菌检测的非冻型尿液DNA保存液,由乙二胺四乙酸二钠(EDTA.Na2)、Tris-HCl、亚硫酸氢钠、Proclin300组成。
优选地,乙二胺四乙酸二钠:Tris-HCl:亚硫酸氢钠的摩尔比=0.5~1.5:1~1.5:4~6。
更优选地,乙二胺四乙酸二钠:Tris-HCl:亚硫酸氢钠的摩尔比=1:1.25:5。
优选地,Proclin300的用量比按照如下比例计:1M乙二胺四乙酸二钠与Proclin300的体积比为3~5:3。
更优选地,Proclin300的用量比按照如下比例计:1M乙二胺四乙酸二钠与Proclin300的体积比为4:3。
另外,优选地,保存液的pH7.5~8.5。
更优选地,保存液的pH8.0。
基于上述保存液配方,可以组建一种适用于生殖道病原菌检测的非冻型尿液DNA保存液试剂盒,含有如下组分(各组分母液):0.5M~1.5M pH7.5~8.5的乙二胺四乙酸二钠溶液、1M~1.5M pH7.5~8.5的Tris-HCl、2M~3M的亚硫酸氢钠溶液、Proclin300。
优选地,试剂盒中各组分母液浓度如下:1M pH8.0的乙二胺四乙酸二钠溶液、1.25M pH8.0的Tris-HCl、2.5M的亚硫酸氢钠溶液、Proclin300。
优选地,各溶液的溶剂均为超纯水。
上述非冻型尿液DNA保存液的制备方法是:将各组分混合后的溶液震荡混匀即可。
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