[发明专利]一种活化谷氨酰胺转氨酶酶原的方法

说明书

本发明涉及食品加工技术领域，尤其是一种活化谷氨酰胺转氨酶酶原的方法，包括以下步骤；步骤一、配料：壳聚糖、4%的醋酸溶液、液体石蜡、乳化剂、致孔剂乙酸乙酯、壳聚糖凝胶、戊二醛溶液、10%的无水乙醇和谷氨酰胺转氨酶酶原溶液；步骤二、制取壳聚糖固形胰蛋白酶微粒；步骤三、将固定化胰蛋白酶微粒制成2‑4cm厚的填充床；步骤四、将谷氨酰胺转氨酶酶原溶液通过填充床进行活化，本发明固相的固定化胰蛋白酶与液相的谷氨酰胺转氨酶酶原是异相反应体系，可以很容易的通过过滤分离，不会引入新的杂质，对下一步谷氨酰胺转氨酶的纯化有利，固定化胰蛋白酶微粒制成的填充床可重复多次使用，活化成本低。

技术领域

本发明涉及食品加工技术领域，尤其涉及一种活化谷氨酰胺转氨酶酶原的方法。

背景技术

谷氨酰胺转氨酶又称转谷氨酰胺酶（TG酶）是由331个氨基组成的分子量约38000的具有活性中心的单体蛋白质，其可催化蛋白质多肽发生分子内和分子间发生共价交联，从而改善蛋白质的结构和功能，对蛋白质的性质如：发泡性，乳化性，乳化稳定性，热稳定性、保水性和凝胶能力等效果显著，进而改善食品的风味、口感、质地和外观等；

目前谷氨酰胺转氨酶酶原的活化方法还不成熟，在活化谷氨酰胺转氨酶酶原的过程中，会对环境产生污染，而且引入了杂质，活化的成本高。

发明内容

本发明的目的在于提供一种活化谷氨酰胺转氨酶酶原的方法，以解决上述背景技术中提出的问题。

为了实现上述目的，本发明采用了如下技术方案：

设计一种活化谷氨酰胺转氨酶酶原的方法，包括以下步骤；

步骤一、配料：壳聚糖、4%的醋酸溶液、液体石蜡、乳化剂、致孔剂乙酸乙酯、壳聚糖凝胶、戊二醛溶液、10%的无水乙醇和谷氨酰胺转氨酶酶原溶液；

步骤二、制取壳聚糖固形胰蛋白酶微粒；

S1、称取一定量的壳聚糖加入反应釜内，将体积分数为4 %的醋酸溶液加入反应釜内进行搅拌，获取质量分数为4 %的壳聚糖酸性溶胶；

S2、向反应釜中加入液体石蜡，并加入适量乳化剂和致孔剂乙酸乙酯，在反应釜的高转速下，通过反应釜的入料口缓慢加入壳聚糖凝胶，高速搅拌3-5h使溶胶液滴均匀分散；

S3、向反应釜的入料口缓慢加入一定量的戊二醛溶液，加热至40-45℃反应1-3 h ，静置冷却将所得乳液与10 %无水乙醇充分混合振荡；

S4、将得到的混合溶液静置10-12h，弃去油层和水层，利用去离子水反复洗涤抽滤至中性后，得到壳聚糖固形胰蛋白酶微粒；

步骤三、制备：将固定化胰蛋白酶微粒制成2-4cm厚的填充床；

步骤四、活化：将谷氨酰胺转氨酶酶原溶液通过填充床进行活化。

优选的，步骤二中，S3、乳液与10 %无水乙醇的体积比为1：1。

优选的，步骤二中，S4、得到壳聚糖固形胰蛋白酶微粒的直径为1-1.5mm粒径的小球。

本发明提出的一种活化谷氨酰胺转氨酶酶原的方法，有益效果在于：

1、本发明固相的固定化胰蛋白酶与液相的谷氨酰胺转氨酶酶原是异相反应体系，可以很容易的通过过滤分离，不会引入新的杂质，对下一步谷氨酰胺转氨酶的纯化有利；

2、本发明固定化胰蛋白酶微粒制成的填充床可重复多次使用，活化成本低；

3、本发明以壳聚糖作为固定化胰蛋白酶的载体材料，作为一种天然高分子生物材料制成的填充床具有良好的生物相容性和生物降解性，安全可靠，对人类无害并且对环境无污染。

具体实施方式