[发明专利]一种抗核抗体的检测方法在审
申请号: | 201811651816.5 | 申请日: | 2018-12-31 |
公开(公告)号: | CN109738652A | 公开(公告)日: | 2019-05-10 |
发明(设计)人: | 陆上苏 | 申请(专利权)人: | 镇江金太医学检验实验室有限公司 |
主分类号: | G01N33/68 | 分类号: | G01N33/68 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 212016 江苏省镇*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 血清 检测 抗核抗体 核抗原 清洗液 稀释液 滴加 清洗 缓冲甘油 缓冲溶液 离心处理 荧光标记 标本 稀释度 有效地 玻片 放入 封固 混入 抗体 稀释 保温 | ||
1.一种抗核抗体的检测方法,包括如下步骤:
滴加缓冲溶液于抗核抗原标本片,静置5-20分钟后弃去,使标本片保持一定湿度;
将待测血清以6000rpm 离心5-150分钟,然后取300μL 稀释液,混入3-15μL 经过离心处理的血清,将上述样品放入温箱中待用;
将步骤b中经过处理的待检血清加入步骤a中的抗核抗原标本片上,将其放入37℃环境中保温10-50分钟;
用清洗液清洗1-5次,每次3-8分钟,待玻片干燥;
滴加经过稀释液稀释的荧光标记的抗体,其稀释度为30-180,然后在37℃环境中保温10-50分钟,再用清洗液清洗;
缓冲甘油封固,进行检测。
2.根据权利要求1所述的抗核抗体的检测方法,其特征在于:所述稀释液由以下成分按重量份数配比组成:三羟甲基氨基甲烷0.1-0.5份、庆大霉素0.2-0.4份、
吐温20 0.1-0.3份、Proclin-300 0.2-0.6份、氨基苯磺酰胺3-8份、胱氨酸1-6份、
氯化钠2-5份、乙二胺四乙酸2-3份、去离子水200-1000份。
3.根据权利要求2所述的抗核抗体的检测方法,其特征在于:所述稀释液由以下成分按重量份数配比组成:三羟甲基氨基甲烷0.3份、庆大霉素0.2份、
吐温20 0.3份、Proclin-300 0.6份、氨基苯磺酰胺5份、胱氨酸3份、氯化钠2份、乙二胺四乙酸3份、去离子水300-500份。
4.根据权利要求1所述的抗核抗体的检测方法,其特征在于:所述清洗液由以下成分按重量份数配比组成:磷酸氢二钠2 .5-5 .5份、吐温20 0.01-0.2份、十二
烷基硫酸钠0.01-0.08份、硫柳汞钠0.3-1份、胱氨酸2-5份、蔗糖6-10份、Proclin 3000 .1-0 .5份、去离子水100-600份。
5.根据权利要求1所述的抗核抗体的检测方法,其特征在于:所述抗原可以是纯化的天然抗原、重组抗原或者人工合成多肽。
6.根据权利要求1所述的抗核抗体的检测方法,其特征在于:荧光素选自异硫氰酸荧光素、四甲基异硫氰酸罗达明或得克萨斯红。
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