[发明专利]高效液相色谱-串联质谱测定水产品中盐酸氯苯胍及其代谢物残留量的方法

权利要求书

1.一种基于时间分段技术的高效液相色谱-串联质谱测定水产品中盐酸氯苯胍及其代谢物残留量的方法，其步骤是：

A、肌肉样品进行处理：称取匀质的肌肉样品，加入盐酸氯苯胍-d₈作为盐酸氯苯胍的内标，依次加入提取剂A、无水硫酸镁涡旋振荡，离心后取上清液，重复提取残留物合并提取液，再加入无水硫酸镁和净化剂B，涡旋振荡并离心，取上清液氮气吹干，残渣用体积比为70:30-80:20的甲醇和水混合液溶解，经孔径不大于0.22μm的滤膜过滤，滤液供HPLC-HESI-MS/MS检测；所述的提取剂A是乙腈含1％甲酸，所述的净化剂B是十八烷基硅烷键合硅胶；

B、HPLC分析条件：C18色谱柱，100mm×2.1mm，3.5μm；柱温：30℃，流速：0.25mL/min；流动相：有机相为甲醇，水相为0.1％甲酸水溶液，梯度洗脱程序：起始梯度为体积浓度25％-35％的甲醇，4.5min内线性增加到体积浓度为85％-95％的甲醇，保持2.5min，0.1min内线性降低到体积浓度为25％-35％的甲醇，最后维持0.9min，进样体积为20μL；

C、HESI-MS/MS分析条件：加热电喷雾离子源，正离子模式和负离子模式切换；检测方式采用选择反应监测模式；正离子模式喷雾电压：3500V，负离子模式喷雾电压：-3000v；蒸发气温度：380℃；鞘气压力50arb；辅助气压力15arb；碰撞气及压力：氩气纯度≥99.999，1.5mTorr；离子传输毛细管温度：350℃；Q1的半峰宽设为0.7，Q3的半峰宽设为0.7，检测参数具体如下：

*定量离子

D、标准曲线法定量：盐酸氯苯胍采用内标法建立标准曲线，对氯苯甲酸、对氯苯甲酰胺乙酸采用外标法建立标准曲线，并据此计算样品浓度。