[发明专利]检测CYP2C19基因多态性位点的引物组、试剂盒和方法在审
| 申请号： | 201811654430.X | 申请日： | 2018-12-30 |
| 公开（公告）号： | CN109468378A | 公开（公告）日： | 2019-03-15 |
| 发明（设计）人： | 朱阳进;赵薇薇;胡昌明;徐艳艳;汤愿笑;甘立佳;于世辉;严慧 | 申请（专利权）人： | 广州金域医学检验中心有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/6883 | 分类号： | C12Q1/6883;C12Q1/6858;C12N15/11 |
| 代理公司： | 北京超凡志成知识产权代理事务所(普通合伙) 11371 | 代理人： | 周文波 |
| 地址： | 510000 广东省*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 引物组 多态性位点 引物组合 试剂盒 检测 基因多态性检测 结果判读 种检测 | ||
1.一种检测CYP2C19基因多态性位点的引物组，其特征在于，其包括以下引物组合中的一种或多种的组合：
引物组合1，其包括SEQ ID NO.1-2所示的扩增引物和SEQ ID NO.7所示的检测引物；
引物组合2，其包括SEQ ID NO.3-4所示的扩增引物和SEQ ID NO.8所示的检测引物；
引物组合3，其包括SEQ ID NO.5-6所示的扩增引物和SEQ ID NO.9所示的检测引物。
2.一种检测CYP2C19基因多态性位点的试剂盒，其特征在于，其包括权利要求1所述的引物组。
3.一种检测CYP2C19基因多态性位点的方法，其特征在于，其包括：
(1)使用权利要求1所述的引物组中的扩增引物对样品进行PCR扩增，得到第一扩增产物；
(2)使用权利要求1所述的引物组中的检测引物对经碱性磷酸酶处理后的第一扩增产物进行单碱基延伸反应，得到第二扩增产物；
(3)采用飞行时间质谱技术分析所述第二扩增产物的多态性。
4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，PCR扩增的体系中含有：所述扩增引物、Mg2+、dNTPs和Taq DNA聚合酶。
5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述扩增引物在体系中的浓度为0.8-1.2μM。
6.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，PCR扩增程序的退火温度为：55-57℃。
7.根据权利要求3-6任一项所述的方法，其特征在于，单碱基延伸反应的体系中含有：所述检测引物和第一扩增产物。
8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述检测引物在单碱基延伸反应的体系中的浓度为2.6-2.8μM。
9.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，进行单碱基延伸反应的程序的退火温度为51-53℃，时间为4-6s。
10.根据权利要求9所述的方法，其特征在于，进行单碱基延伸反应的程序的延伸温度为79-81℃，时间为4-6s。
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