[发明专利]检测疏嘌呤类药物相关基因SNP的试剂盒和方法在审
| 申请号： | 201811654874.3 | 申请日： | 2018-12-30 |
| 公开（公告）号： | CN109385479A | 公开（公告）日： | 2019-02-26 |
| 发明（设计）人： | 甘立佳;赵薇薇;朱阳进;严慧;胡昌明;徐艳艳;汤愿笑;于世辉 | 申请（专利权）人： | 广州金域医学检验中心有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/6886 | 分类号： | C12Q1/6886;C12Q1/6872;C12N15/11 |
| 代理公司： | 北京超凡志成知识产权代理事务所(普通合伙) 11371 | 代理人： | 李永宏 |
| 地址： | 510000 广东省*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 试剂盒 嘌呤类药物 相关基因 引物组合 基因多态性检测 结果判读 多态性 无干扰 种检测 检测 | ||
1.一种检测疏嘌呤类药物相关基因SNP的试剂盒，其特征在于，其包括引物组合1-引物组合4中的一种或多种的组合；
其中，引物组合1包括：SEQ ID NO.1-2所示的扩增引物和SEQ ID NO.9所示的检测引物；
引物组合2包括：SEQ ID NO.3-4所示的扩增引物和SEQ ID NO.10所示的检测引物；
引物组合3包括：SEQ ID NO.5-6所示的扩增引物和SEQ ID NO.11所示的检测引物；
引物组合4包括：SEQ ID NO.7-8所示的扩增引物和SEQ ID NO.12所示的检测引物。
2.一种检测疏嘌呤类药物相关基因SNP的方法，其特征在于，其包括如下步骤：
(1)使用权利要求1所述的试剂盒中的扩增引物对样品进行PCR扩增，得到第一扩增产物；
(2)使用权利要求1所述的试剂盒中的检测引物对经碱性磷酸酶处理后的第一扩增产物进行单碱基延伸反应，得到第二扩增产物；
(3)采用飞行时间质谱技术分析所述第二扩增产物的多态性。
3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，在步骤(1)中，进行PCR扩增的体系含有：引物组合1-引物组合4的扩增引物、Mg2+、dNTPs和Taq DNA聚合酶。
4.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述检测引物在单碱基延伸反应的体系中的总浓度为3-5μM。
5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述检测引物在单碱基延伸反应的体系中的总浓度为3.7-4μM，引物组合1-引物组合4的各检测引物在单碱基延伸反应的体系中的浓度分别是：1.052μM、1.063μM、1.036μM以及0.681μM。
6.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述扩增引物在体系中的浓度为0.8-1.2μM。
7.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，在步骤(1)中，进行PCR扩增的程序的退火温度为：55-57℃。
8.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，在步骤(2)中，进行单碱基延伸反应的体系含有：引物组合1-引物组合4的检测引物和第一扩增产物。
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