[实用新型]一种毛干样本裂解和DNA提取纯化系统有效
申请号: | 201821309359.7 | 申请日: | 2018-08-14 |
公开(公告)号: | CN208933389U | 公开(公告)日: | 2019-06-04 |
发明(设计)人: | 吴渊虬;张惠丹;李倩倩;赵洪玉 | 申请(专利权)人: | 苏州博睿义达生物科技有限公司;苏州绘真生物科技有限公司;苏州工业园区龙兆生物科技研究院有限公司 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10 |
代理公司: | 南京利丰知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 32256 | 代理人: | 王茹;王锋 |
地址: | 215000 江苏省苏州市吴中区苏州*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 反应单元 样本 裂解 密封设置 连通 本实用新型 纯化系统 冲洗液供给单元 消化 反应腔室 供给单元 提供单元 吸附机构 系统结构 反应腔 洗脱液 底端 负压 吸附 室内 | ||
本实用新型公开了一种毛干样本裂解和DNA提取纯化系统。所述系统包括毛干样本裂解机构和DNA提取纯化机构,所述DNA提取纯化机构包括:一个以上的反应单元,每个所述反应单元包括一反应腔室,所述反应腔室内设置有能够吸附DNA分子的吸附机构;一个以上的冲洗液供给单元,其与所述反应单元相互连通且密封设置;一个以上的洗脱液供给单元,其与所述反应单元相互连通且密封设置;负压提供单元,其与每个所述反应单元的底端相互连通且密封设置。本实用新型的系统结构合理,在毛干样本裂解过程中在1小时内便可快速完全消化毛干样本,缩短毛干样本裂解消化和DNA提取纯化时间,且可避免杂质对实验结果的影响,提高实验结果的准确性。
技术领域
本实用新型涉及一种提取纯化DNA的系统,特别涉及一种快速便捷高效的毛干样本快速裂解和DNA提取纯化系统,属于DNA提取技术领域。
背景技术
随着法医检测技术的不断进步,犯罪现场的DNA生物物证已经成为案件侦破的利器,但近几年犯罪嫌疑人的反侦察意识逐步提高,一些常见的生物物证如血液、血斑、唾液等常常被犯罪嫌人清理消除,而一些微量生物物证如毛干样本,由于其易遗留、体积小、不易被发现等特点往往被犯罪嫌疑人忽略而遗留在犯罪现场,如果能成功从毛干样本中提取到DNA并加以分析利用,就能为案件的侦破提供关键线索。但毛干样本中的DNA属于极微量生物物证,对于这类生物物证检验的难点主要在于两方面,一方面样本在化学试剂中反应时间过长极易导致DNA的降解;另一方面在实验操作过程中样本极易被外源性 DNA污染或发生样本间的交叉污染,因此这就要求实验员在实验过程必须尽量缩短样本在化学试剂中的反应时间,同时操作时必须仔细谨慎防止污染。毛干样本用于法医DNA 分型主要分为四个步骤:1.毛干样本的裂解;2.DNA的提取纯化;3.DNA的扩增;4.STR 分型分析。在第一个步骤毛干样本的裂解过程中,由于毛干的结构组成不同于常规生物材料,含有大量的角蛋白,因此毛干样本的裂解消化主要是对角蛋白的降解。现有的裂解消化方式主要为化学方法:加入缓冲液和消化液在蛋白酶K和二硫苏糖醇溶液环境中进行消化反应,需要在56℃条件下消化8小时以上甚至消化过夜,由于蛋白酶K和二硫苏糖醇溶液在反应过程中随着时间推移反应效率会大大降低,因此实验人员在反应过程中需定时观察反应进程多次补加蛋白酶K及二硫苏糖醇溶液(每次各加入20ul),这种消化方式一方面造成了试剂和时间的大量浪费,增加了实验成本,且多次开盖补加试剂极易导致外源性DNA的污染和样本间的交叉污染;另一方面长时间消化反应极易导致DNA被裂解消化所用的化学试剂降解,同时这种消化方式在反应完成后大大降低了样本DNA在反应体系中的浓度,且在试管底部会遗留有大量固体颗粒杂质沉淀,严重影响实验的进一步操作,对实验结果的准确性产生不利影响。在第二个步骤DNA提取纯化过程中,主要原理是在高浓度盐离子存在条件下,DNA分子吸附在硅膜上,之后用冲洗液将盐离子去除后,DNA分子从硅膜上脱落进入洗脱液中从而便于收集。现有的手动操作方式过程繁琐,实验员将样本加入试管后需手动对每个试管多次进行开盖、吸液、加液、闭盖等操作,一方面这种操作方式极易导致样本被外源性DNA污染或发生样本间的交叉污染,且耗费大量的人力和时间,在操作熟练的情况下处理一份样本需30min左右;另一方面实验过程中用到的冲洗液和洗脱液反复长期暴露于空气中易被外源性DNA污染或发生pH值的改变从而影响实验结果。
因此,如何对毛干样本裂解和DNA提取纯化系统的结构进行优化,寻求一种操作快速简便高效,可减少提取过程所需时间,有效避免试剂被外源性DNA污染和发生变质的毛干样本裂解和DNA提取纯化系统,已然成为业界研究人员长期以来一直努力的方向。
实用新型内容
本实用新型的主要目的在于提供一种毛干样本裂解和DNA提取纯化系统,以克服现有技术中的不足。
为实现前述目的,本实用新型采用的技术方案包括:
本实用新型实施例提供了一种毛干样本裂解和DNA提取纯化系统,其包括毛干样本裂解机构和DNA提取纯化机构,其中,所述DNA提取纯化机构包括:
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