[实用新型]一种干细胞体外富集筛选系统

说明书

本实用新型公开了一种干细胞体外富集筛选系统，包括若干个过滤盒串联成的过滤盒组和一个密封的用于盛放过滤盒组的壳体，每个过滤盒内均设有用于吸附骨髓干细胞的吸附膜；过滤盒组可与一个位于壳体外的蠕动泵组成闭环循环系统；干细胞体外富集筛选系统还包括：用于盛放过滤盒，使干细胞从吸附膜上脱落进入干细胞悬液的振荡器，以及一套可使过滤盒并联，用于将干细胞从吸附膜淋洗到干细胞悬液中并回收干细胞悬液的洗脱管路。其技术效果是：其能有效提高干细胞体外富集筛选的效率，通过干细胞快速黏附技术快速收集获得富集有骨髓干细胞的悬液，满足临床只需要干细胞悬液的情况要求。

技术领域

本实用新型涉及干细胞治疗领域的一种干细胞体外富集筛选系统。

背景技术

近年来研究发现的自体干细胞富集技术，即不经过体外培养的干细胞，直接回植，不但能避免免疫排斥反应，而且富集的自体干细胞可以利用局部的微环境实现其定向诱导盒组织再生，由此对一些疾病的治疗带来了希望。其最大的优点是无需体外培养，可在手术同期进行，避免了复杂操作的技术问题和相关的伦理学问题，这是传统方法无法替代和比拟的。随着干细胞研究的不断深入，以骨髓干细胞(bone marrow stem cells， BMSCs)作为种子细胞的细胞治疗受到越来越多的关注。BMSCs促进骨修复的动物实验已获得较为肯定的效果，但进行临床治疗仍受到诸多限制。第一，单纯用自体骨髓血进行治疗时，因单位体积骨髓血中BMSCs量少而使疗效降低。第二，若采用细胞体外培养扩增，则患者要等待一段时间才能进行回植手术，一般约需要3周时间，不能满足临床急诊或及时治疗的需要；且体外培养必须避免各种微生物的污染，对环境和设备的要求较高，因此增加了治疗费用；另外体外培养常以牛胎盘血清为培养基，这也带来了临床细胞治疗的伦理学争议；不用体外培养即能在术中获得高浓度的 BMSCs干细胞富集筛选技术得到了发展。

目前细胞富集筛选技术主要有：流式细胞仪分离法、免疫磁珠分离法、贴壁筛选法和密度梯度离心法。流式细胞仪分离法是应用特异的荧光抗体与细胞表面的抗原标志结合，然后应用流式细胞仪对干细胞进行分选。其分离细胞虽然迅速，纯度高，但是费用昂贵，对含量太低的痕量细胞难以分离，不能处理大量的细胞样品，要获得无菌的干细胞悬液也很困难。

免疫磁珠分离法是利用微磁珠既可结合蛋白质，又可被磁铁吸引的特点，将抗体包被在磁珠上,通过与干细胞表面特异性抗原结合，形成抗原- 抗体磁珠免疫复合物。当该复合物通过分离柱时，在磁力作用下，即与母液分离，从而使干细胞与其他物质分离，达到筛选的目的。其对细胞的活性影响较大，回收率仅有60％-75％，可能会导致细胞完全失活，同样操作较复杂，价格昂贵。

贴壁筛选法是目前实验室最常用的骨髓基质干细胞筛选方法，通过将骨髓血在培养皿中培养，24-48h后骨髓基质干细胞贴壁，借此可将骨髓基质干细胞与其它不贴壁的骨髓细胞分离。其需要时间较长，涉及细胞的体外培养，临床使用有一定难度。

密度梯度离心法是常用的浓缩分离细胞的方法，利用不同细胞成分密度梯度的差异，通过离心可以使细胞在不同层次浓集，结合使用不同比重的分离液，将不同比重的细胞进行分层分离。其需要使用分离介质再最后需要洗去分离介质，要保持整个操作的无菌需要特殊的设备，费用昂贵。

实用新型内容

本实用新型的目的是为了克服现有技术的不足，提供一种干细胞体外富集筛选系统，其可以直接获得干细胞悬液，更能满足临床的多种需要，由于无需使用生物多孔陶瓷，可有效提高干细胞富集筛选的效率，降低干细胞富集筛选，得到干细胞悬液的成本和时间，满足急诊临床手术的要求。

实现上述目的的一种技术方案是：一种干细胞体外富集筛选系统，包括若干过滤盒和一个密封的壳体；

所述过滤盒可在所述壳体内从下至上依次串联为一个过滤盒组，所述过滤盒组可在所述壳体内与一个位于所述壳体外的蠕动泵组成闭环循环系统；

每个过滤盒内均设有用于吸附骨髓干细胞的吸附膜；