[发明专利]用于亚全能干细胞的培养基

权利要求书

1.一种用于真核细胞培养的化学成分确定的培养基，其包含水、至少一种碳源、一种或多种维生素、一种或多种盐、一种或多种脂肪酸、一种或多种缓冲组分、硒、具有抑制干细胞分化能力的TGF-β超家族的至少一种多肽和酸性鞘磷脂酶功能性抑制剂(FIASMA)组的至少一种物质。

2.根据权利要求1所述的化学成分确定的培养基，其中所述FIASMA选自曲米帕明、米帕林、异丙嗪和普罗吩胺，优选地，所述FIASMA是曲米帕明。

3.根据权利要求1或2所述的化学成分确定的培养基，其中所述TGF-β超家族的至少一种多肽选自活化素、nodal、肌肉生长抑制素和GDF3。

4.根据权利要求3所述的化学成分确定的培养基，其中所述TGF-β超家族的至少一种多肽选自活化素，优选所述多肽是活化素a。

5.根据权利要求1至4中任一项所述的化学成分确定的培养基，其中所述化学成分确定的培养基完全不含人或动物来源的物质。

6.根据权利要求1至5中任一项所述的化学成分确定的培养基，其中所述化学成分确定的培养基不含FGF-2、白蛋白和/或TGF-β1中的任意组分。

7.根据权利要求1至6中任一项所述的化学成分确定的培养基，其中所述至少一种FIASMA的浓度在0.1mg/L至10mg/L的范围内，优选在0.5mg/L至5mg/L的范围内。

8.根据权利要求1至7中任一项所述的化学成分确定的培养基，其中所述TGF-β超家族的至少一种多肽的浓度在0.2μg/L至200μg/L的范围内，优选在1μg/L至100μg/L的范围内，更优选在2μg/L至20μg/L的范围内。

9.根据权利要求1至8中任一项所述的化学成分确定的培养基，其中所述一种或多种缓冲组分选自无机碳酸氢盐、无机磷酸盐或4-(2-羟乙基)-1-哌嗪乙磺酸(HEPES)。

10.根据权利要求1至9中任一项所述的化学成分确定的培养基，其中硒的浓度在1μg/L至100μg/L的范围内，优选在10μg/L至50μg/L的范围内。

11.根据权利要求1至10中任一项所述的化学成分确定的培养基，还包含胰岛素和/或转铁蛋白，其中转铁蛋白的浓度在0.1mg/L至100mg/L的范围内，优选在1mg/L至50mg/L的范围内，更优选5mg/L至25mg/L的范围内，并且/或者胰岛素的浓度在0.1mg/L至100mg/L的范围内，优选在1mg/L至10mg/L的范围内。

12.根据权利要求1至11中任一项所述的化学成分确定的培养基，还包含抗坏血酸，其中抗坏血酸的浓度在3mg/L至300mg/L的范围内，优选在10mg/L至100mg/L的范围内。

13.根据权利要求1至12中任一项所述的化学成分确定的培养基的用途，其用于培养真核细胞，优选人亚全能干细胞，更优选人诱导亚全能干细胞。

14.根据权利要求13所述的化学成分确定的培养基的用途，其中亚全能干细胞的培养按照贴壁细胞培养进行，优选地亚全能干细胞的培养在细胞外基质上进行，更优选在无异种成分的细胞外基质上进行。

15.一种细胞培养系统，其包含人亚全能干细胞，优选人诱导亚全能干细胞，和根据权利要求1至12中任一项所述的化学成分确定的培养基。

16.根据权利要求15所述的细胞培养系统，还包含细胞外基质，优选无异种成分的细胞外基质。

17.一种用于细胞培养中增殖和/或维持人亚全能干细胞的试剂盒，包括：

-第一组合物，包含细胞外基质制剂，优选无异种成分的细胞外基质制剂，

-第二组合物，包含水、至少一种碳源、一种或多种维生素、一种或多种盐、一种或多种脂肪酸和一种或多种缓冲组分，

-第三组合物，包含抗坏血酸、硒、胰岛素、转铁蛋白、活化素a和曲米帕明，以及

-任选地，用于细胞解离的第四组合物。