[发明专利]纳米脂质体-微泡缀合物及包含其的用于改善或治疗毛发脱落的组合物有效
| 申请号： | 201880004214.2 | 申请日： | 2018-10-17 |
| 公开（公告）号： | CN110446506B | 公开（公告）日： | 2023-03-24 |
| 发明（设计）人： | 柳智然;元恩廷;李汉润;柳京南 | 申请（专利权）人： | 无尽医疗有限公司 |
| 主分类号： | A61K47/69 | 分类号： | A61K47/69;A61K48/00;A61K9/00 |
| 代理公司： | 北京集佳知识产权代理有限公司 11227 | 代理人： | 郑斌;尹玉峰 |
| 地址： | 韩国*** | 国省代码： | 暂无信息 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 纳米 脂质体 微泡缀合物 包含 用于 改善 治疗 毛发 脱落 组合 | ||
1.纳米脂质体-微泡缀合物，其中Cas9蛋白、抑制SRD5A2基因表达的指导RNA和聚乙烯亚胺的复合物包封在纳米脂质体中，
其中所述抑制SRD5A2基因表达的指导RNA包含SEQ.ID.NO:1、2、3、4或5的碱基序列，
所述纳米脂质体的特征在于，包含卵磷脂、胆固醇、1,2-二棕榈酰基-sn-甘油基-3-磷酸乙醇胺和1,2-二油酰基-sn-甘油基-3-[(N-(5-氨基-1-羧基戊基)亚氨基二乙酸)琥珀酰](镍盐)，并且结合够识别内皮联蛋白(endoglin)的单克隆或多克隆抗体，
所述微泡包含1,2-二棕榈酰基-sn-甘油基-3-磷酸胆碱、联十六烷基磷酸酯、胆固醇、1,2-二棕榈酰基-sn-甘油基-3-磷酸乙醇胺和1,2-二硬脂酰基-sn-甘油基-3-磷酸乙醇胺-N-聚(乙二醇)-2000-N-[3-(2-吡啶基二硫代)丙酸酯。
2.用于改善或治疗毛发脱落的组合物，其包含权利要求1所述的纳米脂质体-微泡缀合物。
3.制备权利要求1所述的纳米脂质体-微泡缀合物的方法，所述方法包括：
通过将纳米脂质体与微泡混合来形成纳米脂质体-微泡缀合物，
所述纳米脂质体通过以下制备：
S1)制备Cas9蛋白、包含SEQ.ID.NO:1、2、3、4或5的碱基序列的抑制SRD5A2基因表达的指导RNA和聚乙烯亚胺的复合物，并通过将卵磷脂、胆固醇、1,2-二棕榈酰基-sn-甘油基-3-磷酸乙醇胺和1,2-二油酰基-sn-甘油基-3-[(N-(5-氨基-1-羧基戊基)亚氨基二乙酸)琥珀酰](镍盐)在氯仿中混合来制备脂质膜组合物；
S2)向所述脂质膜组合物添加所述Cas9蛋白、包含SEQ.ID.NO:1、2、3、4或5的碱基序列的抑制SRD5A2基因表达的指导RNA和聚乙烯亚胺的复合物并进行超声；
S3)对经超声的脂质膜组合物进行冷冻-解冻然后进行超声；
S4)对在S3中进行超声的脂质膜组合物进行离心并回收沉淀的纳米脂质体；以及
S5)使用琥珀酰亚胺基-4-[N-马来酰亚胺基甲基环己烷-1-羧基-[6-酰胺基己酸酯]]及其磺酸酯使能够识别内皮联蛋白(endoglin)的单克隆或多克隆抗体与在S4中获得的所述沉淀的纳米脂质体结合，并且
所述微泡通过以下制备：
A)通过将1,2-二棕榈酰基-sn-甘油基-3-磷酸胆碱、胆固醇、联十六烷基磷酸酯、1,2-二棕榈酰基-sn-甘油基-3-磷酸乙醇胺和1,2-二硬脂酰基-sn-甘油基-3-磷酸乙醇胺-N-聚(乙二醇)-2000-N-[3-(2-吡啶基二硫代)丙酸酯在氯仿中混合来制备脂质膜组合物；
B)将葡萄糖溶液添加至步骤A并进行超声；
C)对在步骤B中进行超声的脂质膜组合物进行冷冻-解冻然后进行超声；以及
D)通过将疏水性气体引入到在步骤C中进行超声的脂质膜组合物中来制备微泡。
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