[发明专利]用于降低色谱中生物负载的组合物和方法

权利要求书

1.用于色谱基质的微生物生物负载降低的方法，所述方法包括使色谱基质与组合物接触，其中所述组合物由下列组成：

(a)0.4M至0.7M乙酸；

(b)0.4M至0.7M乙酸和苯甲醇；

(c)0.1M至0.5M乙酸和1％苯甲醇；或

(d)0.5M至1.0M乙酸和1％至2％苯甲醇；

其中接触步骤进行1小时至4小时。

2.权利要求1的方法，其中接触步骤进行4小时。

3.权利要求1的方法，其中组合物由0.5M乙酸组成，且接触步骤进行至少4小时。

4.用于色谱基质的微生物生物负载降低的方法，所述方法包括使色谱基质与组合物接触，其中所述组合物由下列组成：

(a)0.4M至0.7M乙酸；

(b)0.4M至0.7M乙酸和苯甲醇；

(c)0.1M至0.5M乙酸和1％苯甲醇；或

(d)0.5M至1.0M乙酸和1％至2％苯甲醇；

其中所述接触步骤在色谱基质中产生以下一项或多项结果：产芽孢细菌量降低至少3log₁₀，革兰氏阳性菌量降低至少5log₁₀，和革兰氏阴性菌量降低至少5log₁₀。

5.权利要求4的方法，其中所述接触步骤导致色谱基质中产芽孢细菌、革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌中的一种或多种的量降低至低于选自以下测定的检测限：(1)生物过滤测定、(2)显微细菌染色、(3)IR/FTIR光谱法、(4)无菌试验和(5)细菌鉴定试验。

6.权利要求5的方法，其中所述产芽孢细菌为类坚强芽孢杆菌，革兰氏阳性菌为微杆菌属(Microbacterium spp.)，和革兰氏阴性菌为嗜麦芽寡养单胞菌(Stenotrophomonasmaltophilia)。

7.权利要求1-6中任一项的方法，其中组合物的pH为2至3。

8.权利要求1-6中任一项的方法，其中接触步骤在15℃至30℃的温度进行。

9.权利要求8的方法，其中接触步骤在20℃至25℃的温度进行。

10.权利要求1的方法，其中所述色谱基质包括与载体偶联的蛋白质配体。

11.一种在施加包含用于纯化的药剂的组合物之前降低微生物负载的方法，其包括

提供色谱基质；

进行权利要求1的方法；和

将包含蛋白质的组合物施加于色谱基质以纯化蛋白质。

12.权利要求1的方法，其中组合物由0.4M至0.7M乙酸组成。

13.权利要求1的方法，其中组合物由0.4M至0.7M乙酸和苯甲醇组成。

14.权利要求1的方法，其中组合物由0.4M至0.5M乙酸组成。

15.权利要求1的方法，其中组合物由0.1M至0.5M乙酸和1％苯甲醇组成。

16.权利要求1的方法，其中组合物由0.5M至1.0M乙酸和1％至2％苯甲醇组成。

17.权利要求1的方法，其中所述组合物由下列组成：

(a)0.4M至0.7M乙酸；

(b)0.4M至0.7M乙酸和苯甲醇；或

(c)0.5M至1.0M乙酸和1％至2％苯甲醇。

18.权利要求4的方法，其中所述组合物由下列组成：

(a)0.4M至0.7M乙酸；

(b)0.4M至0.7M乙酸和苯甲醇；或

(c)0.5M至1.0M乙酸和1％至2％苯甲醇。