[发明专利]内胚层细胞团、和由多能细胞制造三胚层中的任意胚层的细胞团的方法在审
| 申请号： | 201880008797.6 | 申请日： | 2018-01-26 |
| 公开（公告）号： | CN110234754A | 公开（公告）日： | 2019-09-13 |
| 发明（设计）人： | 伊吹将人;大河内仁志;矢部茂治 | 申请（专利权）人： | 株式会社钟化;国立研究开发法人国立国际医疗研究中心 |
| 主分类号： | C12N5/073 | 分类号： | C12N5/073;C12N5/10 |
| 代理公司： | 北京市柳沈律师事务所 11105 | 代理人： | 沈雪 |
| 地址： | 日本*** | 国省代码： | 日本;JP |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 内胚层细胞 细胞治疗制剂 体细胞 细胞团 胚层 未分化细胞 多能细胞 治疗效果 分化 制造 | ||
1.一种内胚层细胞团，其中，相对于OAZ1基因的表达量的Nanog基因的相对表达量为0.8以下，相对于OAZ1基因的表达量的HNF1B基因的相对表达量为1.0以上，呈现出SOX17阳性的细胞比率为80％以上。
2.根据权利要求1所述的内胚层细胞团，其中，相对于OAZ1基因的表达量的HNF4A基因的相对表达量进一步为0.5以上。
3.根据权利要求1或2所述的内胚层细胞团，其中，相对于OAZ1基因的表达量的EpCAM基因的相对表达量进一步为0.6以上。
4.根据权利要求1～3中任一项所述的内胚层细胞团，其中，相对于OAZ1基因的表达量的VIM基因的相对表达量进一步为12以下。
5.根据权利要求1～4中任一项所述的内胚层细胞团，其中，相对于OAZ1基因的表达量的SOX2基因的相对表达量进一步为0.11以下。
6.根据权利要求1～5中任一项所述的内胚层细胞团，其中，相对于OAZ1基因的表达量的c-Myc基因的相对表达量进一步为0.1以下。
7.根据权利要求1～6中任一项所述的内胚层细胞团，其中，相对于OAZ1基因的表达量的纤维连接蛋白-1基因的相对表达量进一步为1.0以上。
8.根据权利要求1～7中任一项所述的内胚层细胞团，其中，相对于OAZ1基因的表达量的细胞周期蛋白D1基因的相对表达量进一步为0.015以下。
9.根据权利要求1～8中任一项所述的内胚层细胞团，其中，相对于OAZ1基因的表达量的基质金属肽酶2基因的相对表达量进一步为0.020以下。
10.一种由多能干细胞制造内胚层细胞的方法，所述方法包括以下所示的(a)～(b)：
(a)用包含2-巯基乙醇的培养基对多能干细胞进行悬浮培养，制备细胞团的工序；以及
(b)用包含TGFβ超家族信号活化剂的培养基培养所述细胞团后，用未添加FGF2和BMP4的培养基培养所述细胞团的工序。
11.根据权利要求10所述的制造方法，其中，包含2-巯基乙醇的培养基为未添加活化素A的培养基。
12.根据权利要求10或11所述的制造方法，其中，包含2-巯基乙醇的培养基为未添加WNT信号活化剂的培养基。
13.根据权利要求10～12中任一项所述的制造方法，其中，包含2-巯基乙醇的培养基为未添加FGF2的培养基。
14.根据权利要求10～13中任一项所述的制造方法，其中，包含2-巯基乙醇的培养基为未添加TGFβ1的培养基。
15.根据权利要求10～14中任一项所述的制造方法，其中，包含2-巯基乙醇的培养基是进一步包含胰岛素的培养基。
16.根据权利要求10～15中任一项所述的制造方法，其中，未添加FGF2和BMP4的培养基是包含选自胰岛素、运铁蛋白、亚硒酸钠和乙醇胺中的至少1种以上的培养基。
17.根据权利要求10～16中任一项所述的方法，其中，包含TGFβ超家族信号活化剂的培养基和/或未添加FGF2和BMP4的培养基是进一步包含2-巯基乙醇的培养基。
18.根据权利要求10～17中任一项所述的方法，其中，包含TGFβ超家族信号活化剂的培养基和/或未添加FGF2和BMP4的培养基是以1.0g/L以下的浓度含有葡萄糖的培养基。
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