[发明专利]重组细胞、重组细胞的制备方法以及异戊二烯或萜烯的生产方法

权利要求书

1.一种重组细胞，其能够生产异戊二烯或萜烯，所述重组细胞具有通过甲羟戊酸途径合成异戊烯二磷酸的能力，其中，

选自DOXP合成酶、DOXP还原异构酶、4-二磷酸胞苷-2-C-甲基-D-赤藓糖醇合成酶、4-二磷酸胞苷-2-C-甲基-D-赤藓糖醇激酶、2-C-甲基-D-赤藓糖醇-2,4-环二磷酸合成酶、HMB-PP合成酶以及HMB-PP还原酶中的至少一种内源性酶的活性发生了缺失，从而缺失了通过内源性非甲羟戊酸途径合成异戊烯二磷酸的能力，

作为第一外源基因，所述重组细胞具有编码异戊二烯合成酶的基因、编码单萜合成酶的基因、编码倍半萜合成酶的基因、编码二萜合成酶的基因、编码角鲨烯合成酶的基因或编码八氢番茄红素合成酶的基因，其中，

表达所述第一外源基因，能够生产异戊二烯或碳原子数为10、15、20、30或40的萜烯。

2.根据权利要求1所述的重组细胞，其中，

所述甲羟戊酸途径是外源性甲羟戊酸途径。

3.根据权利要求2所述的重组细胞，其中，

通过所述外源性甲羟戊酸途径合成异戊烯二磷酸的能力是通过第二外源基因实现的：所述第二外源基因编码选自乙酰CoA乙酰转移酶、HMG-CoA合成酶、HMG-CoA还原酶、甲羟戊酸激酶、5-磷酸甲羟戊酸激酶以及二磷酸甲羟戊酸脱羧酶中的至少一种酶。

4.根据权利要求1～3中任一项所述的重组细胞，其是细菌。

5.根据权利要求1～3中任一项所述的重组细胞，其是古细菌。

6.根据权利要求1～3中任一项所述的重组细胞，其能够用选自一氧化碳和二氧化碳中的至少一种作为唯一碳源进行增殖。

7.根据权利要求1～3中任一项所述的重组细胞，其具有由甲基四氢叶酸或甲基四氢蝶呤、一氧化碳以及CoA来合成乙酰CoA的功能。

8.根据权利要求6或7所述的重组细胞，其是梭菌属(Clostridium)细菌或穆尔氏菌属(Moorella)细菌。

9.根据权利要求6或7所述的重组细胞，其是属于甲烷八叠球菌属(Methanosarcina)、甲烷球菌(Methanococcus)或甲烷热球菌属(Methanothermococc)的古细菌。

10.根据权利要求1～3中任一项所述的重组细胞，其能够由选自甲烷、甲醇、甲胺、甲酸、甲醛以及甲酰胺中的至少一种C1化合物来生产异戊二烯或萜烯。

11.根据权利要求10所述的重组细胞，作为甲醛的固定化途径，所述重组细胞具有选自丝氨酸途径、核酮糖单磷酸途径以及木酮糖单磷酸途径中的至少一种C1碳同化途径。

12.根据权利要求10或11所述的重组细胞，其属于Methylacidphilum属、甲基弯曲菌属(Methylosinus)、甲基胞囊菌属(Methylocystis)、甲基杆菌属(Methylobacterium)、甲基胞菌属(Methylocella)、甲基球菌属(Methylococcus)、甲基单胞菌属(Methylomonas)、甲基杆状菌属(Methylobacter)、甲基小杆菌属(Methylobacillus)、嗜甲基菌属(Methylophilus)、甲基娇养杆菌属(Methylotenera)、食甲基菌属(Methylovorus)、甲基微菌属(Methylomicrobium)、噬甲基菌属(Methylophaga)、嗜甲基菌属(Methylophilaceae)或甲基营养菌属(Methyloversatilis)。