[发明专利]因子IX融合蛋白及其制备和使用方法

权利要求书

1.一种将因子IX(FIX)融合蛋白给予有此需要的受试者的方法，其包括向受试者皮下给予FIX融合蛋白，其中

(a)所述FIX融合蛋白包含FIX多肽和至少一个XTEN，所述至少一个XTEN在插入位点处插入所述FIX多肽内，所述插入位点对应于选自以下的氨基酸：SEQ ID NO:2的氨基酸103、SEQ ID NO:2的氨基酸105、SEQ ID NO:2的氨基酸142、SEQ ID NO:2的氨基酸149、SEQ IDNO:2的氨基酸162、SEQ ID NO:2的氨基酸166、SEQ ID NO:2的氨基酸174、SEQ ID NO:2的氨基酸224、SEQ ID NO:2的氨基酸226、SEQ ID NO:2的氨基酸228、SEQ ID NO:2的氨基酸413及其任何组合，并且

(b)其中在给予后，所述FIX融合蛋白在所述受试者中展现出约5％至约30％的血浆活性。

2.一种将因子IX(FIX)融合蛋白给予有此需要的受试者的方法，其包括向受试者皮下给予包含FIX多肽和Fc结构域的FIX融合蛋白，其中所述FIX融合蛋白包含与SEQ ID NO:229具有至少约80％序列同一性的氨基酸序列，其中在给予后，所述FIX融合蛋白在所述受试者中展现出约5％至约30％的血浆活性。

3.根据权利要求1或2的方法，其中所述FIX融合蛋白是以约50IU/kg至约400IU/kg的剂量给予。

4.根据权利要求1至3中任一项的方法，其中所述FIX融合蛋白展现出约10％至约30％的血浆活性峰值。

5.根据权利要求1至4中任一项的方法，其中所述FIX融合蛋白展现出约5％至约10％的血浆活性谷值。

6.根据权利要求1和3至5中任一项的方法，其中所述插入位点对应于选自以下的氨基酸：SEQ ID NO:2的氨基酸149、SEQ ID NO:2的氨基酸162、SEQ ID NO:2的氨基酸166、SEQID NO:2的氨基酸174及其任何组合。

7.根据权利要求1和3至6中任一项的方法，其中所述XTEN包含至少约6个氨基酸、至少约12个氨基酸、至少约36个氨基酸、至少约42个氨基酸、至少约72个氨基酸、至少约144个氨基酸或至少约288个氨基酸。

8.根据权利要求1和3至7中任一项的方法，其中所述XTEN包含与选自SEQ ID NO:34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、202、203、204、205、206、207、208、209、210、211、212、213、214、230及其任何组合的氨基酸序列至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％、至少约99％或约100％相同的氨基酸序列。

9.根据权利要求1和3至8中任一项的方法，其中所述XTEN包括AE72。

10.根据权利要求1和3至9中任一项的方法，其中所述FIX融合蛋白还包含第二XTEN，其中所述XTEN在对应于SEQ ID NO:2的氨基酸166的插入位点处插入所述FIX多肽内，并且其中所述第二XTEN与所述FIX多肽的C端融合。

11.根据权利要求1和3至10中任一项的方法，其中所述FIX融合蛋白还包含Fc结构域。

12.根据权利要求2至11中任一项的方法，其中所述FIX融合蛋白还包含第二Fc结构域。

13.根据权利要求12的方法，其中所述FIX融合蛋白还包含两条多肽链，其中第一多肽链包含与所述Fc结构域融合的FIX多肽，并且第二多肽链包含第二Fc结构域，其中所述第一Fc结构域和所述第二Fc结构域通过共价键缔合。