[发明专利]包括去免疫化的志贺毒素A亚基效应子和CD8+ T细胞表位的细胞靶向分子

权利要求书

1.细胞靶向分子，包括：

i)志贺毒素效应子多肽，其包含具有羧基末端的志贺毒素A1片段区域，并且包含：

a)嵌入或插入的异源CD8+T细胞表位；

b)至少一个内源B细胞和/或CD4+T细胞表位区域的破坏，该表位区域不与所述嵌入或插入的异源CD8+T细胞表位重叠；

b)和

c)A1片段衍生区域的羧基末端的破坏的弗林蛋白酶切割基序；

ii)能够特异性结合至少一个细胞外靶生物分子的异源结合区域，和

iii)未嵌入或插入所述志贺毒素A1片段区域的异源CD8+T细胞表位货物。

2.权利要求1的细胞靶向分子，其中，通过将所述细胞靶向分子施用于细胞，其中所述细胞与被结合区域结合的细胞外靶生物分子物理偶联，导致所述细胞靶向分子被所述细胞内化，和所述细胞在细胞表面上呈递与MHC I类分子复合的CD8+T细胞表位货物。

3.权利要求2的细胞靶向分子，其中，所述CD8+T细胞表位与所述志贺毒素效应子多肽或所述结合区域融合。

4.权利要求3所述的细胞靶向分子，其中，所述细胞靶向分子包含含有所述结合区域、所述志贺毒素效应子多肽和所述CD8+T细胞表位货物的单链多肽。

5.权利要求3所述的细胞靶向分子，其中，所述结合区域包含两条或更多条多肽链，并且所述CD8+T细胞表位货物与包含所述志贺毒素效应子多肽和所述两条或更多条多肽链之一的多肽融合。

6.权利要求1-5中任一项的细胞靶向分子，其中，所述CD8+T细胞表位货物定位于志贺毒素A1片段衍生区域的羧基末端的羧基端。

7.权利要求1-6中任一项的细胞靶向分子，其包含与志贺毒素效应子多肽的羧基末端相关联的分子部分。

8.权利要求7的细胞靶向分子，其中，所述分子部分包含所述结合区域。

9.权利要求7的细胞靶向分子，其中，所述分子部分具有细胞毒性。

10.权利要求7-9中任一项的细胞靶向分子，其中，所述分子部分包含至少一个氨基酸，并且所述志贺毒素效应子多肽与所述分子部分的至少一个氨基酸残基连接。

11.权利要求10的细胞靶向分子，其中，所述分子部分和所述志贺毒素效应子多肽融合形成连续多肽。

12.权利要求1-11中任一项的细胞靶向分子，其中，所述结合区域包含选自由以下各项组成的组的多肽：

单结构域抗体片段、单链可变片段、抗体可变片段、互补决定区3片段、受约束的FR3-CDR3-FR4多肽、Fd片段、抗原结合片段、犰狳重复多肽、纤连蛋白来源的第10纤连蛋白III型结构域、肌腱蛋白III型结构域、锚蛋白重复基序结构域、低密度脂蛋白受体来源的A结构域、脂质运载蛋白、Kunitz结构域、蛋白质A来源的Z结构域、γ-B晶状体蛋白来源的结构域、泛素来源的结构域、Sac7d来源的多肽、Fyn来源的SH2结构域、微蛋白、C型凝集素样结构域支架以及保留结合功能性的任何前述的经遗传操作的对应物。

13.权利要求1-12中任一项的细胞靶向分子，其中，所述志贺毒素效应子多肽包含与选自以下的序列具有至少75％，85％，95％，96％，97％，98％或更高同一性的序列，或由其组成：

(i)SEQ ID NO:1-18中任一个的氨基酸75至251；

(ii)SEQ ID NO:1-18中任一个的氨基酸1至241；

(iii)SEQ ID NO:1-18中任一个的氨基酸1至251；和

(iv)SEQ ID NO:1-18中任一个的氨基酸1至261。