[发明专利]用于离体扩增和活化自然杀伤细胞的刺激细胞系在审
| 申请号： | 201880021218.1 | 申请日： | 2018-03-27 |
| 公开（公告）号： | CN110494557A | 公开（公告）日： | 2019-11-22 |
| 发明（设计）人： | 神谷尚宏;达里奥·坎帕纳 | 申请（专利权）人： | 新加坡国立大学 |
| 主分类号： | C12N5/0783 | 分类号： | C12N5/0783;A61K35/17;C12N15/24;C12N15/28;C12N15/13;A61P35/00;A61P31/00 |
| 代理公司： | 11227 北京集佳知识产权代理有限公司 | 代理人： | 顾晋伟;刘振佳<国际申请>=PCT/SG |
| 地址： | 新加坡*** | 国省代码： | 新加坡;SG |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 膜结合 扩增 混合细胞培养物 基因工程细胞 白细胞介素 感染性疾病 免疫细胞群 抗CD3抗体 工程细胞 免疫细胞 治疗癌症 永生化 癌细胞 核酸 活化 可用 配体 亚群 修饰 制备 细胞 刺激 | ||
1.基因工程细胞群，其不表达主要组织相容性复合物(MHC)I分子，
其中所述工程细胞群来源于永生化细胞，
其中所述工程细胞群被修饰以表达膜结合白细胞介素-15(mbIL15)，
其中所述工程细胞群被修饰以表达膜结合4-1BB配体(4-1BBL)，
其中所述工程细胞群被修饰以表达至少一种刺激免疫细胞活化的另外的膜结合白细胞介素，
其中所述工程细胞群不表达主要组织相容性复合物(MHC)I分子，并且
其中所述工程细胞群与免疫细胞群的共培养导致至少一个免疫细胞亚群的活化和扩增。
2.权利要求1所述的工程细胞群，其中所述mbIL15由包含SEQ ID NO.1的核酸序列编码。
3.权利要求1所述的工程细胞群，其中所述4-1BBL由包含SEQ ID NO.13的核酸序列编码。
4.权利要求1所述的工程细胞群，其中每个膜结合分子与人CD8α的跨膜结构域偶联。
5.权利要求4所述的工程细胞群，其中人CD8α的所述跨膜结构域包含SEQ ID NO.18的序列。
6.权利要求1所述的工程细胞群，其中所述工程细胞群来源于选自以下的细胞系：K562细胞、肾母细胞瘤细胞系HFWT、子宫内膜肿瘤细胞系HHUA、黑素瘤细胞系HMV-II、肝母细胞瘤细胞系HuH-6、肺小细胞癌细胞系Lu-130或Lu-134-A、神经母细胞瘤细胞系NB19或NB69、胚胎癌睾丸细胞系NEC14、宫颈癌细胞系TCO-2和神经母细胞瘤细胞系TNB1。
7.权利要求1所述的工程细胞群，其中所述工程细胞群缺少MHC II分子的表达。
8.权利要求1所述的工程细胞群，其中所述工程细胞群来源于K562细胞。
9.根据权利要求1至8中任一项所述的工程细胞群，其中所述白细胞介素包含IL12A或其片段。
10.权利要求9所述的工程细胞群，其中所述IL12A包含SEQ ID NO.4的序列。
11.根据权利要求1至8中任一项所述的工程细胞群，其中所述白细胞介素包含IL12B或其片段。
12.权利要求11所述的工程细胞群，其中所述IL12B包含SEQ ID NO.6的序列。
13.根据权利要求1至8中任一项所述的工程细胞群，其中所述白细胞介素包含IL12A和IL12B或其片段。
14.根据权利要求1至8中任一项所述的工程细胞群，其中所述工程细胞群还表达膜结合IL18(mbIL18)或其片段。
15.权利要求14所述的工程细胞群，其中所述IL18包含SEQ ID NO.8的序列。
16.根据权利要求1至8中任一项所述的工程细胞群，其中所述工程细胞群还表达膜结合IL21(mbIL21)或其片段。
17.权利要求16所述的工程细胞群，其中所述IL21包含SEQ ID NO.10的序列或其片段。
18.权利要求1所述的工程细胞群，其中所述细胞表达膜结合IL22(mbIL22)或其片段。
19.权利要求18所述的工程细胞群，其中所述IL22包含SEQ ID NO.12的序列或其片段。
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