[发明专利]在薄膜培养装置中快速检测大肠杆菌

说明书

本发明提供一种用于差分计数大肠菌群和大肠杆菌(Escherichia coli)微生物的菌落的装置。所述装置包括不透水的第一片；不透水的第二片，所述第二片附接到所述第一片；干燥的可再水合培养基，所述培养基包含乳糖发酵指示剂体系、包含增强大肠杆菌中的β‑葡糖苷酸酶酶活性的多种化合物的β‑D‑葡糖苷酸酶指示剂体系、氧化还原指示剂体系和粘附到所述第一片第一冷水可溶性胶凝剂，所述培养基设置在微生物生长区中；和第二冷水可溶性胶凝剂，所述第二冷水可溶性胶凝剂粘附到所述第二片。所述微生物生长区设置在所述第一片和所述第二片之间。还提供使用所述装置的方法。

相关申请的交叉引用

本申请要求2017年4月3日提交的美国临时专利申请62/480,633的权益，该专利申请的公开内容以引用方式全文并入本文。

背景技术

在食品和饮料安全测试中，大肠型细菌的存在或不存在被认为是质量的重要证据。在世界许多国家，饮料和某些食品(例如乳制品)中允许的大肠型细菌的量受到控制。大肠型细菌包括粪便大肠菌群，诸如大肠杆菌(Escherichia coli)。食品或水样品中存在的粪便大肠菌群被用作食品或水的粪便污染以及可能存在的其他病原微生物的主要指示剂。

用于检测、鉴定和/或计数食品样品中的微生物的方法通常根据食品的性质以及可能存在于样品中的微生物的类型而有所不同。用于测试食品样品的方法概要包括由美国公共卫生协会(华盛顿特区(Washington,D.C.))公布的第27版增刊“Standard Methodsfor the Examination of Dairy Products(乳品检验标准方法)”，以及由美国食品药品监督管理局(华盛顿特区(Washington,D.C.))公布的“Bacteriological Analytical Manual(细菌学分析手册)”(“BAM”)。通常将固体食品悬浮于含水介质中，并混合和/或研磨以得到可用于微生物定量分析方法中的食品材料的匀浆液。

然而，上述方法通常相对昂贵，涉及多个步骤，需要约24小时至48小时的温育时间段才能计数菌落，并且/或者需要相对复杂的仪器和/或相对高度训练的人员。

需要用于计数食品和饮料样品中的活大肠菌群和大肠杆菌(E.coli)微生物的更快的方法。

发明内容

一般来讲，本公开涉及检测和任选地计数样品中的微生物。具体地，本公开涉及可用于在半固体培养基中使大肠型细菌的菌落形成单位(CFU)生长以及差分计数大肠菌群CFU和大肠杆菌CFU的培养装置。本发明培养装置包括增强大肠杆菌中的β-葡糖苷酸酶活性的多种化合物，并且尤其可用于检测和区分β-葡糖苷酸酶阳性大肠杆菌I，例如组成型和诱导型β-葡糖苷酸酶阳性大肠杆菌的菌落，从而提供对样品中存在的微生物的更准确计数。培养基通常含有TTC，其能够使得产生非β葡糖苷酸酶的大肠型细菌的区分和可视化成为可能。此外，该装置中使用的培养基通常比先前的薄膜培养装置更快地检测和计数大肠型细菌和大肠杆菌