[发明专利]成体多能干细胞的制备、扩增及应用在审
| 申请号： | 201880022885.1 | 申请日： | 2018-04-03 |
| 公开（公告）号： | CN110546251A | 公开（公告）日： | 2019-12-06 |
| 发明（设计）人： | 李劭伟;胡敏;赫尔曼·彼得·洛伦兹 | 申请（专利权）人： | 小利兰·斯坦福大学托管委员会 |
| 主分类号： | C12N5/071 | 分类号： | C12N5/071;A61K35/12 |
| 代理公司： | 44348 广州文冠倪律知识产权代理事务所(普通合伙) | 代理人： | 倪小敏;何锦标<国际申请>=PCT/US |
| 地址： | 美国加利*** | 国省代码： | 美国;US |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 细胞 休眠 活化 多能干细胞 血液样品 哺乳动物 干细胞 外周血 细胞群 小细胞 富集 分化 治疗 | ||
1.一种组合物，其包含至少1000个细胞，其中至少50％的所述细胞是表达CD45且直径小于5 µm的CD45+细胞。
2.根据权利要求1所述的组合物，其中所述CD45+细胞进一步被表征为CD34阳性且ABCG2阴性。
3.根据权利要求1或2所述的组合物，其中至少75％的所述细胞是CD45+细胞。
4.根据权利要求1或2所述的组合物，其中至少95％的所述细胞是CD45+细胞。
5.根据权利要求1-4的任一项所述的组合物，其包含至少10,000个细胞。
6.根据权利要求1-5的任一项所述的组合物，其中少于20％的所述细胞是红细胞。
7.根据权利要求1-6的任一项所述的组合物，其中所述CD45+细胞的直径小于3 μm。
8.根据权利要求1-6的任一项所述的组合物，其中所述CD45+细胞的直径是约2 μm至约3μm。
9.根据权利要求1-8的任一项所述的组合物，其中所述CD45+细胞进一步被表征为Lin阴性。
10.根据权利要求1-9的任一项所述的组合物，其中所述CD45+细胞包含小RNA和核糖体RNA，其中小RNA与核糖体RNA的比例为至少约20：1、或至少约15：1、或至少约10：1、或至少约5：1。
11.根据权利要求1-10的任一项所述的组合物，其中所述CD45+细胞的核质比（v/v）是至少约9：1、或至少约8：1、或至少约7：1、或至少约6：1、或至少约5：1。
12.根据权利要求1-11的任一项所述的组合物，其中所述CD45+细胞进一步表达一种或多种选自以下的标记物：CD44、CD150、Sca1、c-kit、Thy1.1(CD90.1)、Oct 4、SSEA1、Nanog、Vasa、CD133和CD105。
13.根据权利要求1-12的任一项所述的组合物，其中所述CD45+细胞不表达一种或多种选自以下的标记物：CD41、Lin、E-钙粘蛋白和CD184。
14.根据权利要求1-13的任一项所述的组合物，其中所述CD45+细胞能够被包含一种或多种因子的培养基活化，其中被活化的细胞表达ABCG2。
15.一种培养细胞的方法，其包含：在培养基中培养多种哺乳动物细胞，该培养基与选自原代肝细胞、人肝母细胞瘤（HepG2）细胞、肝细胞细胞系和小鼠胚胎成纤维（MEF）细胞系中的至少一种接触或已经用其进行了调节。
16.根据权利要求15所述的方法，其中所述细胞（a）直径小于5 μm，且（b）表达CD45。
17.根据要求要求15所述的方法，其中所述细胞进一步被表征为CD34阳性和ABCG2阴性。
18.根据权利要求17所述的方法，其中所述细胞在培养之后表达ABCG2。
19.根据权利要求18所述的方法，其中所述培养至少持续1小时。
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