[发明专利]改进的钙卫蛋白测定法在审

专利信息
申请号: 201880022915.9 申请日: 2018-03-28
公开(公告)号: CN110546508A 公开(公告)日: 2019-12-06
发明(设计)人: 埃尔林·松德列哈根;卡特林·森德;汤姆·尼尔森;阿尔诺·大卫 申请(专利权)人: 根田股份有限公司
主分类号: G01N33/543 分类号: G01N33/543;G01N33/68;G01N33/84
代理公司: 31220 上海旭诚知识产权代理有限公司 代理人: 郑立;丁惠敏<国际申请>=PCT/EP2
地址: 挪威*** 国省代码: 挪威;NO
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摘要:
搜索关键词: 反应缓冲液 钙卫蛋白 缓冲液 校准物 抗钙卫蛋白抗体 比浊免疫测定 颗粒增强 准确度 测定法 固定化 改进
【说明书】:

样品中钙卫蛋白的浓度可使用颗粒增强比浊免疫测定法以改进的准确度确定,所述测定法包含固定化到颗粒的抗钙卫蛋白抗体或其片段、反应缓冲液和在缓冲液中的包含钙卫蛋白的校准物;其中校准物缓冲液和/或反应缓冲液的选择由样品的特性决定。

技术领域

本公开涉及诊断测定法领域,并且具体地涉及用于确定样品中钙卫蛋白浓度的改进的测定方法和试剂盒。

背景技术

钙卫蛋白为哺乳动物蛋白S100A8和哺乳动物蛋白S100A9的复合物,属于S100家族。钙卫蛋白在中性粒细胞和单核细胞中表达。在钙的存在下,钙卫蛋白复合物能够经由螯合作用螯合必需营养素锰和锌。因此,钙卫蛋白表现出抗微生物特性,并且被认为是先天宿主防御机制的重要部分。

据说钙卫蛋白以二聚体、三聚体和四聚体形式存在。作为二聚体,钙卫蛋白包含多肽链S100A8和S100A9。人S100A8由93个氨基酸残基组成,并且分子量为10.8kDa。S100A9含有113个氨基酸残基,并且分子量为13.2kDa。因此,在二聚体形式中,钙卫蛋白的分子量为24kDa。作为三聚体,钙卫蛋白为一种36kDa异三聚体蛋白,具有非共价连接的两条重链(13.2kDa)和一条轻链(10.8kDa)。作为四聚体,钙卫蛋白为一种48kDa异三聚体蛋白,具有非共价连接的两条重链(13.2kDa)和两条轻链(10.8kDa)。此外,存在S100A9的截短同种型,这是由于另一种翻译致使N末端中4个第一残基的丢失(《美国质谱学会杂志(J Am SocMass Spectrom.)》1999年11月;10(11):1124-30。)它的分子量为12.7kDa。截短形式结合到二聚体形式中致使形成分子量为23.5kDa的稍小的复合物。钙卫蛋白可能的同种型的示例列于表1中:

表1.钙卫蛋白同种型的分子量区间

同种型分子量
单体10.8kDa至13.2kDa
同二聚体21.6kDa至26.4kDa
异二聚体23.5kDa至25.9kDa
三聚体32.4kDa至39.6kDa
四聚体43.2kDa至52.8kDa

钙卫蛋白已被用作中性粒细胞活化的标志物,并且已被证明在涉及中性粒细胞活化的炎症性条件下升高。在血液和粪便中检测到钙卫蛋白水平升高,并且钙卫蛋白的存在被认为是炎症的重要标志物。

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