[发明专利]从孵化的爬行动物卵分离用于生产生物人造皮肤和皮革的细胞

权利要求书

1.获得用于爬行动物皮革生产的细胞的体外方法，其特征在于包括以下步骤：

a.从孵化的爬行动物卵中获得细胞，及

b.分离和/或培养角朊细胞、成纤维细胞、黑素细胞、干细胞或前体细胞。

2.根据前述任一权利要求所述的方法，其特征在于通过使用表面标记物分离细胞。

3.根据前述任一权利要求所述的方法，其特征在于通过流式细胞术分离所述细胞，例如，通过荧光激活细胞分选法(FACS)。

4.根据前述任一权利要求所述的方法，其特征在于通过在细胞特异性培养基中培养细胞的混合培养物来分离细胞，以获得特定细胞类型的基本上纯的培养物。

5.根据前述任一权利要求所述的方法，其特征在于其中一种细胞类型的基本上纯的培养物通过将一种类型的细胞与其他细胞物理地分开而获得，例如，通过胰蛋白酶消化。

6.根据前述任一权利要求所述的方法，其特征在于从绒毛尿囊膜分离细胞。

7.根据前述任一权利要求所述的方法，其特征在于从尿囊、尿囊腔、羊膜、羊膜囊、蛋白、卵黄或卵黄囊分离细胞。

8.根据前述任一权利要求所述的方法，其特征在于表皮和真皮干细胞、间充质干细胞、黑素细胞和/或成纤维细胞通过在细胞特异性培养基中进行培养分离。

9.根据前述任一权利要求所述的方法，其特征在于角朊细胞、成纤维细胞或黑素细胞通过干细胞或前体细胞的分化获得。

10.根据权利要求5所述的方法，其特征在于成纤维细胞由间充质干细胞分化成。

11.根据前述任一权利要求所述的方法，其特征在于在存在至少一种生长因子的情况下对细胞进行培养。

12.根据前述任一权利要求所述的方法，其特征在于在存在成纤维细胞生长因子、表皮生长因子和/或结缔组织生长因子的情况下对细胞进行培养。

13.根据前述任一权利要求所述的方法，其特征在于在饲养细胞层上培养细胞。

14.根据前述任一权利要求所述的方法，其特征在于所述细胞未经基因修饰。

15.根据前述任一权利要求所述的方法，其特征在于其包括获得角朊细胞、成纤维细胞和黑素细胞的基本上纯的培养物。

16.根据前述任一权利要求所述的方法，其特征在于将一种或多种细胞类型的培养物冻存。

17.根据前述任一权利要求所述的方法，其特征在于从一个物种获得角朊细胞、成纤维细胞和黑素细胞。

18.根据前述任一权利要求所述的方法，其特征在于从同一卵获得角朊细胞、成纤维细胞、黑素细胞。

19.根据前述任一权利要求所述的方法，其特征在于从同一物种的不同卵中分离出不同的细胞类型。

20.根据前述任一权利要求所述的方法，其特征在于从不同物种的不同卵中分离出不同的细胞类型。

21.根据前述任一权利要求所述的方法，其特征在于所述爬行动物选自：鳄目动物(短吻鳄和鳄鱼)、龟鳖目(陆龟和海龟)、蚓蜥、有鳞目(蜥蜴和蛇)及喙头目(大蜥蜴或喙头蜥)。