[发明专利]Bcl-2相关死亡促进因子(BAD)磷酸化的小分子抑制剂

说明书

本发明涉及通式(I)化合物：其中R¹、n、R^2a、R^2b和R³如本文中所限定。所述化合物是Bcl‑2相关死亡促进因子(BAD)磷酸化的抑制剂并且具有抗凋亡活性，并且可用于治疗癌症，特别是乳腺癌、子宫内膜癌、卵巢癌、肝癌、结肠癌、前列腺癌或胰腺癌。

本发明涉及新的化合物，并且特别地涉及作为癌细胞中Bcl-2相关死亡促进因子(Bcl-2-associated death promoter，BAD)之抑制剂的化合物，涉及所述化合物用于治疗或预防癌症，并且涉及包含所述化合物的药物组合物。

凋亡或程序性细胞死亡是一种调节机制，主要参与消除自身反应性免疫细胞、衰老细胞和具有不可修复之DNA损伤的细胞[1]。凋亡在脊椎动物中通过两种不同机制执行——外在途径和内在途径[2]。在缺氧条件下、严重的基因组损伤后、氧化应激或生长因子耗尽后，内在途径被激活[3]。BCL-2家族蛋白在调节内在凋亡途径中具有关键作用[4]。已经鉴定出超过20种BCL-2家族成员，并大致分为抗凋亡蛋白、促凋亡蛋白和仅BH3蛋白(BH3-only protein)。BCL-2、BCL-xL和BCL-w是抗凋亡的；BAK和BAX是促凋亡的；而BAD、BIM、PUMA和NOXA是主要的促凋亡的仅BH3蛋白[5-7]。因此，BCL-2家族成员发挥促凋亡和抗凋亡功能二者，并在二者之间保持平衡，并且通常抑制促凋亡的仅BH3蛋白以确保稳态[8]。

凋亡的抑制导致不适当的细胞存活以及癌症的发生和/或进展[9-11]。在大多数恶性肿瘤中，抗凋亡蛋白的表达提高，导致发生对凋亡的抵抗力。Bcl-2相关死亡促进因子(BAD)通过与Bcl-2、Bcl-xL和Bcl-w相互作用在调节凋亡中发挥关键作用[12]。人BAD通过p44/42MAP激酶在Ser75(等效的鼠残基为Ser112)处磷酸化，并且通过AKT/p70S6K在Ser99(等效的鼠残基为Ser136)处磷酸化[13]。这两个丝氨酸残基还通过Pim家族激酶磷酸化以阻止凋亡[14]。BAD在这些残基中任一处的磷酸化导致hBAD与BCL-xL或BCL-2异二聚的能力丧失[15]。磷酸化的BAD蛋白与14-3-3蛋白异二聚，并被隔离在细胞质中[16]。凋亡开始后，BAD经历去磷酸化并与BCL-2、BCL-xL或BCL-w异二聚化，这允许BAK和BAX促进细胞色素C向细胞质的释放，并随后促进内在凋亡途径[17]。还已经报道，BAD在细胞内具有其他蛋白质和功能相互作用。例如，BAD表达受p53调节，并且BAD与p53复合以促进凋亡[18]。Bad被p53转录上调，并在线粒体形成Bad/p53复合物以诱导凋亡[18]。临床上，高BAD表达与前列腺癌中的高Gleason评分相关[15]，并且已报道BAD磷酸化预示了卵巢癌的差的总体存活[19]并且与对顺铂的耐药性相关[19]。此外，在乳腺癌的CD44阳性癌症干细胞(cancer stemcell，CSC)群中的超过80％中观察到了磷酸化的BAD，并且已经报道BAD磷酸化对于CSC存活是必需的[20]。

已经开发出程序性细胞死亡的许多小分子调节剂，其靶向BCL-2家族蛋白以用于针对多种人恶性肿瘤的治疗应用[21-23]。迄今为止，还没有报道仅BH3蛋白(例如BAD)的小分子调节剂。因此，有必要开发通过抑制BAD磷酸化而不影响上游事件来控制癌症的更好且高效的化合物/治疗。

在本发明中，提供了通式(I)化合物或者其可药用盐、溶剂合物或水合物或者其氘化或氚化变体，包括所有立体异构体：

其中：