[发明专利]通过适体-介导的多腺苷酸化信号可及性来调控基因表达

权利要求书

1.用于调控靶基因的表达的多核苷酸盒，其包含核糖开关，其中所述核糖开关包含效应物茎环和适体，其中所述效应物茎包含多腺苷酸化信号，和其中所述适体和效应物茎环通过可替代共有茎臂连接，所述可替代共有茎臂包含与适体茎的非共有臂和效应物茎环的非共有臂互补的序列。

2.权利要求1的多核苷酸盒，其中所述适体结合小分子配体。

3.权利要求1的多核苷酸盒，其中与适体茎中的序列和效应物茎环中的序列互补的可替代共有茎臂的部分是4-8个核苷酸、5-7个核苷酸、5个核苷酸或6个核苷酸。

4.权利要求1的多核苷酸盒，其中所述适体茎是6-12个碱基对、7-10个碱基对、8个碱基对或9个碱基对。

5.权利要求1的多核苷酸盒，其中所述效应物茎环的茎是4-24个碱基对、5-20个碱基对、9-14个碱基对、9个碱基对、10个碱基对、11个碱基对或12个碱基对。

6.权利要求1-5的多核苷酸盒，其中所述效应物茎环位于适体的3′，使得可替代共有茎臂包含3′适体茎臂的全部或一部分和效应物茎的5′臂的全部或一部分。

7.权利要求6的多核苷酸盒，其中所述多腺苷酸化信号是AATAAA或ATTAAA。

8.权利要求1-5的多核苷酸盒，其中所述效应物茎环位于适体的5′，使得可替代共有茎臂包含5′适体茎臂的全部或一部分和效应物茎的3′臂的全部或一部分。

9.权利要求8的多核苷酸盒，其中所述多腺苷酸化信号是下游元件(DSE)。

10.权利要求1-5的包含两个核糖开关的多核苷酸盒，其中第一个核糖开关的效应物茎环包含多腺苷酸化信号AATAAA或ATTAAA的全部或一部分，和第二个核糖开关的效应物茎环包含下游元件(DSE)的全部或一部分。

11.权利要求10的多核苷酸盒，其中所述两个核糖开关各自包含结合相同配体的适体。

12.权利要求10的多核苷酸盒，其中所述两个核糖开关包含结合不同配体的不同适体。

13.一种调节靶基因的表达的方法，其包括：

a. 将一个或多个权利要求1-5的多核苷酸盒插入靶基因的3′非翻译区中，

b. 将包含多核苷酸盒的靶基因引入细胞中，和

c. 将细胞暴露于有效增加靶基因的表达的量的结合适体的配体。

14.权利要求13的方法，其中所述配体是小分子。

15.权利要求13的方法，其中所述效应物茎环位于适体的3′，使得可替代共有茎臂包含3′适体茎臂的全部或一部分和效应物茎的5′臂的全部或一部分。

16.权利要求15的方法，其中所述多腺苷酸化信号是AATAAA或ATTAAA。

17.权利要求13的方法，其中所述效应物茎环位于适体的5′，使得可替代共有茎臂包含5′适体茎臂的全部或一部分和效应物茎的3′臂的全部或一部分。

18.权利要求17的多核苷酸盒，其中所述多腺苷酸化信号是下游元件(DSE)。

19.权利要求13或权利要求14的方法，其中将两个核糖开关插入靶基因的3′ UTR中，其中第一个核糖开关的效应物茎环包含多腺苷酸化信号AATAAA或ATTAAA的全部或一部分，和第二个核糖开关的效应物茎环包含下游元件(DSE)的全部或一部分。