[发明专利]人角质形成细胞的培养方法在审
申请号: | 201880029803.6 | 申请日: | 2018-05-04 |
公开(公告)号: | CN110914407A | 公开(公告)日: | 2020-03-24 |
发明(设计)人: | 卡尔·特吕格瓦松;莫里卡·苏里亚那·特金;蔡文忠 | 申请(专利权)人: | 新加坡国立大学;新加坡保健服务集团有限公司 |
主分类号: | C12N5/071 | 分类号: | C12N5/071;A61K35/36;A61P17/02;A61P17/00 |
代理公司: | 北京天昊联合知识产权代理有限公司 11112 | 代理人: | 张珂珂;朱雯 |
地址: | 新加坡*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 角质 形成 细胞 培养 方法 | ||
1.一种扩增角质形成细胞的方法,包括:
将角质形成细胞铺板于用含有α4链或α5链的层粘连蛋白包被的基质上。
2.根据权利要求1所述的方法,其中所述含有α4链或α5链的层粘连蛋白是层粘连蛋白-411、层粘连蛋白-421、层粘连蛋白-511或层粘连蛋白-521中的至少一者。
3.根据权利要求1所述的方法,进一步包括在无异源物质的细胞培养基中培养角质形成细胞。
4.根据权利要求1所述的方法,进一步包括将新鲜分离的角质形成细胞铺板于所述基质上。
5.根据权利要求1所述的方法,进一步包括将所述角质形成细胞以约0.7x105/cm2至约1.2x105/cm2的密度铺板于所述基质上。
6.根据权利要求1所述的方法,进一步包括在约30℃至约40℃的温度下在所述基质上培养所述角质形成细胞。
7.根据权利要求1所述的方法,进一步包括在含有约5%CO2至约15%CO2的气氛中培养所述角质形成细胞。
8.根据权利要求1所述的方法,进一步包括周期性地解离和传代所述角质形成细胞。
9.根据权利要求8所述的方法,其中在细胞密度达到1细胞/cm2至约1.5x104细胞/cm2时发生所述角质形成细胞的传代。
10.根据权利要求1所述的方法,其中所述基质包被有层粘连蛋白-511和层粘连蛋白-421。
11.根据权利要求10所述的方法,其中层粘连蛋白-511与层粘连蛋白-421的重量比为15:1至1:15。
12.一种用于扩增角质形成细胞的系统,包括:
含有层粘连蛋白-411、层粘连蛋白-421、层粘连蛋白-511或层粘连蛋白-521的基质;以及
细胞培养基。
13.根据权利要求12所述的系统,其中所述细胞培养基不含异源物质。
14.根据权利要求12所述的系统,其中所述细胞培养基不含任何动物血清。
15.根据权利要求12所述的系统,其中所述系统不包含任何饲养细胞。
16.根据权利要求12所述的系统,其中,所述基质含有层粘连蛋白511和层粘连蛋白421。
17.一种用于体外扩增角质形成细胞的细胞培养试剂盒,包括:
具有层粘连蛋白-411、层粘连蛋白-421、层粘连蛋白-511或层粘连蛋白-521的包被层的细胞培养基质;以及
无血清细胞培养基。
18.一种治疗患者的烧伤的方法,包括:
将取自所述患者的供区的角质形成细胞铺板于包被有层粘连蛋白-411、层粘连蛋白-421、层粘连蛋白-511或层粘连蛋白-521的基质上;
在所述基质上进行所述角质形成细胞的扩增;以及
用来自所述基质的所述角质形成细胞覆盖所述烧伤创伤。
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