[发明专利]多重同型特异性抗体检测在审
申请号: | 201880030887.5 | 申请日: | 2018-03-29 |
公开(公告)号: | CN110869514A | 公开(公告)日: | 2020-03-06 |
发明(设计)人: | C·贝尔托齐;S·J·加利;K·穆凯;P·罗宾逊;蔡政廷;M·蔡 | 申请(专利权)人: | 小利兰·斯坦福大学托管委员会 |
主分类号: | C12Q1/6851 | 分类号: | C12Q1/6851;C12Q1/6804;C12Q1/6806;G01N33/68;G01N33/48;G01N33/52;G01N33/53;G01N33/532;G01N33/543 |
代理公司: | 北京龙双利达知识产权代理有限公司 11329 | 代理人: | 孙涛;肖鹂 |
地址: | 美国加利*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 多重 特异性 抗体 检测 | ||
1.一种检测样品中的目标抗体同型的方法,所述方法包含:
a)使所述样品与以下接触:i)抗体结合剂与包含条形码的第一部分的第一DNA分子的结合物,和ii)抗原与包含条形码的第二部分的第二DNA分子的结合物,其中如果所述样品中存在所述目标抗体同型,则所述抗原结合到所述目标抗体同型,并且所述抗体结合剂特异性结合到所述目标抗体同型,从而形成复合物;
b)使所述复合物中的所述第一DNA分子与所述第二DNA分子连接,其中所述条形码的所述第一部分和所述条形码的所述第二部分连接而形成完整条形码;以及
c)检测所述完整条形码,其指示所述样品中的所述目标抗体同型的存在。
2.根据权利要求1所述的方法,其中所述连接包含:
a)使所述复合物与桥接寡核苷酸接触,其中所述桥接寡核苷酸包含与所述第一DNA分子充分互补且能够杂交的第一部分,以及与所述第二DNA分子充分互补且能够杂交的第二部分,其中所述第一DNA分子和所述第二DNA分子在所述复合物中彼此充分邻近,以同时与所述桥接寡核苷酸杂交;以及
b)使所述复合物中的所述第一DNA分子与所述第二DNA分子连接,以产生包含所述完整条形码的连接产物。
3.根据权利要求1所述的方法,其中所述连接包含使所述第一DNA分子中的核苷酸序列与所述第二DNA分子中的互补核苷酸序列杂交。
4.根据权利要求3所述的方法,其中所述第一和第二DNA分子的互补核苷酸序列具有至少6个核苷酸的长度。
5.根据权利要求3所述的方法,其进一步包含使用聚合酶延伸所杂交的所述第一和第二DNA分子以产生包含所述完整条形码的核酸。
6.根据权利要求5所述的方法,其中所述聚合酶在等温条件下使用。
7.根据权利要求1所述的方法,其中所述目标抗体同型选自由以下组成的组:免疫球蛋白E(IgE)、免疫球蛋白M(IgM)、免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白A(IgA)和免疫球蛋白D(IgD)。
8.根据权利要求7所述的方法,其中所述IgG选自由IgG1、IgG2、IgG3和IgG4组成的组。
9.根据权利要求1所述的方法,其中所述抗体结合剂包含特异性结合到所述目标抗体同型的抗体、抗体模拟物或适体。
10.根据权利要求9所述的方法,其中特异性结合到所述目标抗体同型的所述抗体选自由以下组成的组:单克隆抗体、多克隆抗体、嵌合抗体、纳米抗体、抗体的重组片段、Fab片段、Fab'片段、F(ab')2片段、Fv片段和scFv片段。
11.根据权利要求9所述的方法,其中特异性结合到所述目标抗体同型的所述抗体选自由以下组成的组:抗IgE抗体、抗IgM抗体、抗IgG抗体、抗IgA抗体和抗IgD抗体。
12.根据权利要求1所述的方法,其中所述检测是使用聚合酶链反应(PCR)、等温扩增或微阵列分析进行。
13.根据权利要求1所述的方法,其进一步包含定量所述目标抗体同型的量。
14.根据权利要求13所述的方法,其中所述定量包含进行定量PCR(qPCR)。
15.根据权利要求1所述的方法,其中所述样品获自患有免疫病症的受试者。
16.根据权利要求15所述的方法,其中所述免疫病症选自由过敏症、感染、自身免疫病症、炎性病症组成的组。
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