[发明专利]间充质干细胞的制造方法及其应用

说明书

本发明的课题在于提供一种通过简便的工序进行的向脂肪细胞的分化受到抑制的间充质干细胞的制造方法及间充质干细胞，还提供一种利用上述的间充质干细胞的制造方法的分化诱导的细胞的制造方法、分化诱导的细胞及向脂肪细胞分化的分化抑制剂。根据本发明，提供一种向脂肪细胞的分化受到抑制的间充质干细胞的制造方法，所述制造方法包括在溶解有具有来自于胶原蛋白的部分氨基酸序列的氨基酸序列的重组明胶的液体培养基中培养间充质干细胞的工序。

技术领域

本发明涉及一种通过简便的工序进行的向脂肪细胞的分化受到抑制的间充质干细胞的制造方法。本发明涉及一种包括在分化诱导培养基中，培养抑制分化成上述脂肪细胞的间充质干细胞的工序的经分化诱导的细胞的制造方法。本发明涉及一种通过上述方法来制造的间充质干细胞及经分化诱导的细胞。本发明还涉及一种向脂肪细胞分化的分化抑制剂。

背景技术

活体内的脂肪细胞积聚所伴随的肥胖症及代谢综合症发病的基础为因存在于所积聚的脂肪细胞中的巨噬细胞引起的炎症反应。脂肪细胞的起源为间充质干细胞，骨细胞、软骨细胞、心肌细胞及脂肪细胞等由间充质干细胞诱导。正在研究抑制间充质干细胞的分化的方法。

专利文献1中记载有，使用刚性处于150～750kPa的范围的凝胶及基质来保存间充质干细胞组的方法。专利文献2中记载有，脂肪分化抑制剂，其包含具有与RANK(NF-κB的受体活化剂)的半胱氨酸富集区(cysteine rich doma in)之一类似的序列的环肽来作为有效成分。专利文献3中记载有，具有特定的氨基酸序列且具有诱导人体骨髓干细胞的增殖/分化的抑制的活性的肽。专利文献4中记载有，在原核生物细胞内以最少单位表达从人Delta1的序列得到的多肽，使用改性剂及还原剂进行纯化来得到的具有干细胞分化抑制活性的多肽。

另一方面，作为再生医疗中的代表性脚手架材料，已知有明胶。明胶作为活体适当性较高且安全性高的材料而被知晓，医疗用途中的应用实情高。专利文献5中记载有，细胞支撑体，其由基因重组明胶(重组明胶)构成，且由具有规定特性的多孔体构成。

现有技术文献

专利文献

专利文献1：日本特开2015-043780号公报

专利文献2：日本特开2014-198686号公报

专利文献3：日本特开平3-228683号公报

专利文献4：日本特开2007-326834号公报

专利文献5：国际公开WO2011/108537号

发明内容

发明要解决的技术课题

专利文献1中，以规定的范围内的比率混合丙烯酰胺与双丙烯酰胺并进行凝胶化，由此制作具有规定刚性的凝胶，但是操作复杂。专利文献2～4中记载有，使用肽或多肽来抑制向脂肪的分化的内容，但是还期望通过简便的工序，抑制从间充质干细胞向脂肪细胞的分化的方法。

本发明的课题在于提供一种通过简便的工序进行的向脂肪细胞的分化受到抑制的间充质干细胞的制造方法及通过上述方法来制造的间充质干细胞。本发明的另一课题在于提供一种利用上述的间充质干细胞的制造方法的经分化诱导的细胞的制造方法及通过上述方法来制造的经分化诱导的细胞。本发明的另一个课题在于提供一种向脂肪细胞分化的分化抑制剂。

用于解决技术课题的手段

本发明人等为了解决上述课题而进行深入研究的结果，发现了通过在溶解有具有来自于胶原蛋白的部分氨基酸序列的氨基酸序列的重组明胶的液体培养基中培养间充质干细胞而能够制造向脂肪细胞的分化受到抑制的间充质干细胞。本发明是根据这些见解来完成的。

即，根据本发明，可提供以下发明。