[发明专利]合理的多倍体腺相关病毒载体及其制造和使用方法

权利要求书

1.分离的AAV病毒粒子，其具有至少两种来自由AAV衣壳蛋白VP1、VP2和VP3组成的组的病毒结构蛋白，其中所述两种病毒蛋白足以形成将AAV基因组衣壳化的AAV病毒粒子，且其中存在的病毒结构蛋白中的至少一种来自与另一种病毒结构蛋白不同的血清型，且其中VP1仅来自一种血清型，VP2仅来自一种血清型，且VP3仅来自一种血清型。

2.权利要求1的分离的AAV病毒粒子，其中所有三种病毒结构蛋白均存在。

3.权利要求2的分离的AAV病毒粒子，其中所有三种病毒结构蛋白均来自不同的血清型。

4.权利要求2的分离的AAV病毒粒子，其中三种结构蛋白中仅一种来自不同的血清型。

5.权利要求4的分离的AAV病毒粒子，其中与其他两种病毒结构蛋白不同的一种病毒结构蛋白是VP1。

6.权利要求4的分离的AAV病毒粒子，其中与其他两种病毒结构蛋白不同的一种病毒结构蛋白是VP2。

7.权利要求4的分离的AAV病毒粒子，其中与其他两种病毒结构蛋白不同的一种病毒结构蛋白是VP3。

8.权利要求1-7的病毒粒子的基本上均质的群体，其中所述群体是至少10¹个病毒粒子。

9.权利要求8的病毒粒子的基本上均质的群体，其中所述群体是至少10⁷个病毒粒子。

10.权利要求8的病毒粒子的基本上均质的群体，其中所述群体是至少10⁷至10¹⁵个病毒粒子。

11.权利要求8的病毒粒子的基本上均质的群体，其中所述群体是至少10⁹个病毒粒子。

12.权利要求8的病毒粒子的基本上均质的群体，其中所述群体是至少10¹⁰个病毒粒子。

13.权利要求8的病毒粒子的基本上均质的群体，其中所述群体是至少10¹¹个病毒粒子。

14.权利要求10的病毒粒子的基本上均质的群体，其中病毒粒子的群体是至少95%均质的。

15.权利要求10的病毒粒子的基本上均质的群体，其中病毒粒子的群体是至少99%均质的。

16.产生腺相关病毒(AAV)病毒粒子的方法，其包括在形成AAV病毒粒子的条件下，使细胞与第一核酸序列和第二核酸序列接触，其中所述AAV病毒粒子由至少VP1和VP3病毒结构蛋白形成，其中第一核酸编码来自仅第一AAV血清型的VP1，但不能表达VP3，且第二核酸序列编码来自不同于第一AAV血清型的仅第二AAV血清型的VP3，且进一步不能表达VP1，且其中，所述AAV病毒粒子包含来自仅第一血清型的VP1和来自仅第二血清型的VP3，且如果表达VP2，则其仅来自一种血清型。

17.权利要求16的方法，其中所述第一核酸在VP2和VP3的起始密码子中具有突变，所述突变阻止从由第一核酸转录的RNA翻译VP2和VP3，且进一步其中，所述第二核酸在VP1的起始密码子中具有突变，所述突变阻止从由第二核酸转录的RNA翻译VP1。

18.权利要求16的方法，其中表达来自仅一种血清型的VP2。

19.权利要求18的方法，其中VP2来自与VP1不同的血清型和与VP3不同的血清型。