[发明专利]用于心脏再生的组合物和方法

说明书

本公开提供了使用水凝胶递送系统的基于微小RNA的疗法，该疗法通过靶向心肌细胞为心肌梗塞提供了再生方法。该水凝胶提供了可用于促进心肌细胞增殖的微小RNA(例如miR‑302模拟物)的局部和持续的心脏递送。还提供了适合于局部和持续释放的组合物以及用于心肌内凝胶递送miRNA寡核苷酸的方法。

技术领域

本公开涉及用于改善心脏功能的方法和组合物，特别是在诸如心肌梗塞的心脏损伤之后。该组合物包括适于在一定的时间段内持续释放微小RNA的主客体水凝胶。该微小RNA刺激心脏细胞增殖并恢复心脏功能。

相关申请的交叉引用

本申请要求2017年3月31日提交的美国临时申请No.62/479,908的优先权，其全部内容通过引用合并于此。

电子提交的文本文件的说明

通过电子方式提交的文本文件的内容通过引用全文并入本文：序列表的计算机可读格式副本(文件名：PERA_001_01WO_SeqList_ST25.txt，记录日期：2018年3月27日，文件大小5KB)。

背景技术

在美国，心脏病是导致死亡的主要原因，每年导致600,000多人死亡。在美国，心肌梗塞(MI)或心脏病发作每年分别导致370,000例死亡。通过医疗和手术创新改善对急性心肌梗死的管理，使高达95％的患者能够在最初的住院治疗中幸存下来。但是，这些患者中有许多会发展成慢性心力衰竭，导致心梗后五年的死亡率达到50％。

尽管已使用多种治疗方法来预防心脏病发作，但它们仍然是公共卫生问题。预防措施可降低心脏病发作的发生率，但是在初次心脏病发作后，心脏组织受到损害，主要挑战是成年心脏中心肌细胞更新的能力有限。因此，在本领域中仍然需要用于治疗心脏病发作的受害者和其他具有心脏损伤的患者的疗法，以恢复心脏功能。

近年来，微小RNA(MicroRNA)在治疗方面已引起越来越多的关注。微小RNA(miRNA)是小的内源性RNA分子(约21-25nt)，通过靶向一种或多种mRNA进行翻译抑制或切割来调节基因表达。它们是小的抑制性RNA，能够以高互补性抑制靶基因的翻译。通过克隆或计算预测，已经在诸如病毒、蠕虫和灵长类动物等生物中鉴定出数千种miRNA。

一组miRNA，即miR-302-367簇，具有较高的细胞内丰度，并且是特异于胚胎干细胞的细胞类型。该miRNA-302-367簇最初是从cDNA文库中鉴定出来的，该文库是使用未分化的hESC(人类胚胎干细胞)的大小分级RNA(17-26nt)通过定向克隆产生的。该簇被编码在人类4号染色体上，并包含以多顺反子方式共转录的九种不同的miRNA：miR-302a、miR-302a*、miR-302b、miR-302b*、miR-302c、miR-302c*、miR-302d、miR-367和miR-367*。miR-302家族包含7个具有高度保守5′区域的miRNA。miR-302-367簇首先被鉴定为在mESC(鼠ESC)、hESC及其恶性对应物hECC中表达。

发明内容

该申请公开了用于miR-30模拟物的受控释放的主客体水凝胶制剂。该水凝胶包含环糊精修饰的透明质酸(HA)(CD-HA)和金刚烷修饰的HA(AD-HA)以及胆固醇修饰的miR-302模拟物。该水凝胶适用于收缩组织，其中miR-302的释放性质可持续约7天有效刺激心肌细胞增殖。出人意料的是，尽管胆固醇和环糊精之间的相互作用改变了miR-302模拟物的释放特性，包括胆固醇修饰的miR-302模拟物并没有显著破坏主客体水凝胶。

附图说明