[发明专利]用于与角膜营养不良有关的等位基因的多重检测的方法

权利要求书

1.用于检测在受试者中角膜营养不良的反应混合物，所述反应混合物包含标记探针，所述标记探针包含选自SEQ ID NO：25-30、36和54的突变核苷酸序列。

2.根据权利要求1所述的反应混合物，还包含相应的标记探针，所述相应的标记探针包含选自SEQ ID NO：19-24、33和50的正常核苷酸序列。

3.根据权利要求2所述的反应混合物，其中所述标记探针选自由SEQ ID NO：25-30、36和54的突变核苷酸序列组成；和/或所述相应的标记探针由选自SEQ ID NO：19-24、33和50的正常核苷酸序列组成。

4.根据权利要求1至3中任一项所述的反应混合物，其中所述反应混合物包含标记TGFBI G623D探针，所述标记TGFBI G623D探针包含SEQ ID NO：36的核苷酸序列；以及标记TGFBI M502V探针，所述标记TGFBI M502V探针包含SEQ ID NO：30的核苷酸序列。

5.根据权利要求1至4中任一项所述的反应混合物，其中所述标记探针是荧光标记的。

6.根据权利要求1至5中任一项所述的反应混合物，其中所述标记探针中的每一种包含不同的探针，并且独立地用VIC、FAM、ABY或JUN标记。

7.根据权利要求1至6中任一项所述的反应混合物，还包含至少一种扩增引物对，所述扩增引物对用于从来自所述受试者的生物样品中扩增TGFBI基因序列。

8.根据权利要求1至7中任一项所述的反应混合物，还包含：

(a)相应的正向引物，其包含选自SEQ ID NO：7-12和41的核苷酸序列；和

(b)相应的反向引物，其包含选自SEQ ID NO：13-18和47的核苷酸序列。

9.反应试剂盒，包含(a)根据权利要求4至8中任一项所述的反应混合物，和(b)与所述反应混合物分开的用于选自R124S、A546D、H572R和H626R的一种或更多种TGFBI突变的一种或更多种标记探针。

10.根据权利要求9所述的反应试剂盒，其中所述一种或更多种标记探针选自包含SEQID NO：19、25、20、26、21、27、23、29、50和54的核苷酸序列的标记探针。

11.根据权利要求9所述的反应试剂盒，其中所述反应试剂盒包含标记TGFBIR124S探针，所述标记TGFBIR124S探针包含SEQ ID NO：19或25的核苷酸序列。

12.根据权利要求9所述的反应试剂盒，其中所述反应试剂盒包含标记TGFBI A546D探针，所述标记TGFBI A546D探针包含SEQ ID NO：20或26的核苷酸序列。

13.根据权利要求9所述的反应试剂盒，其中所述反应试剂盒包含标记TGFBI H572R探针，所述标记TGFBI H572R探针包含SEQ ID NO：21或27的核苷酸序列。

14.根据权利要求9所述的反应试剂盒，其中所述反应试剂盒包含标记TGFBIH626R探针，所述标记TGFBI H626R探针包含SEQ ID NO：23、29、50或54的核苷酸序列。

15.根据权利要求8所述的反应试剂盒，还包含第三扩增引物组。