[发明专利]用于改良植物性状的方法

权利要求书

1.一种用于筛选和鉴定期望的植物改良性状的方法，所述方法包括以下步骤：

a.从预定来源的采样获得遗传物质；

b.从所述遗传物质构建表达文库；

其中所述方法还包括以下步骤：

c.产生用所述表达文库转化的植物，转化效率为至少0.05％至30％，代表至少10²-10¹⁰个转基因；

d.筛选表达所述期望性状的转化植物；和

e.鉴定所述转化植物的表达所述期望性状的所述转基因。

2.根据权利要求1所述的方法，还包括根据从所述转基因获得的遗传信息编辑期望作物植物中的靶基因的步骤。

3.根据权利要求2所述的方法，其中使用任何基因组编辑系统或方法进行所述靶基因的所述编辑，包括使用选自由以下所组成的组的工程化核酸酶的系统：大范围核酸酶、锌指核酸酶(ZFN)、基于转录激活因子样效应子的核酸酶(TALEN)、成簇规则间隔的短回文重复序列(CRISPR)系统及其任意组合。

4.根据权利要求1所述的方法，其中所述预定来源包括环境生态位的植物、微生物、真菌或其它生物或其部分。

5.根据权利要求1所述的方法，其中所述筛选步骤包括与对照植物相比对所述转化植物的测量，所述测量选自由以下所组成的组：膨压测量、植物死亡、叶面积、植物地上部分鲜重、叶数、枝鲜重、主枝长度、花产量、荚或果实产量、缺绿症、叶损伤、植物的状态或性能及其任意组合。

6.根据权利要求5所述的方法，其中所述对照植物是与所述转基因植物相同属但是缺少所述转基因的植物，或者与所述转基因植物相同属、缺少所述转基因并且用赋予所述植物改良性状的已知基因转化的植物。

7.根据权利要求1所述的方法，其中所述步骤(a)还包括通过在富培养基或选择性培养基上生长来富集所述遗传物质的步骤。

8.根据权利要求1所述的方法，其中所述步骤(a)还包括通过在针对所述期望性状的选择性培养基上培养所述遗传物质来增强所述期望性状的表达的步骤。

9.根据权利要求1所述的方法，其中所述步骤(b)包括产生原核cDNA文库或真核cDNA文库或两者的步骤。

10.根据权利要求1所述的方法，其中所述步骤(b)还包括将所述cDNA文库克隆到至少一种双元载体中的步骤。

11.根据权利要求10所述的方法，其中所述双元载体包含组成型启动子或胁迫诱导型启动子。

12.根据权利要求10所述的方法，其中所述双元载体包含细菌选择标志物和植物转化选择标志物。

13.根据权利要求10所述的方法，还包括将所述克隆的双元载体转化到宿主细胞中的步骤。

14.根据权利要求10所述的方法，还包括将所述克隆的双元载体转化到根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)中的步骤。

15.根据权利要求14所述的方法，还包括将所述转化的根癌农杆菌引入到以下至少一种中的步骤：整株植物、植物组织和植物细胞。

16.根据权利要求15所述的方法，包括通过向所述植物喷洒包含转化的农杆菌的接种物来引入所述转化的根癌农杆菌的步骤。

17.根据权利要求1所述的方法，其中所述步骤(d)包括在对所述期望性状具有选择性的条件下生长所述转化植物。