[发明专利]使用转化的T细胞培养自然杀伤细胞的方法有效
| 申请号： | 201880034893.8 | 申请日： | 2018-05-25 |
| 公开（公告）号： | CN110662834B | 公开（公告）日： | 2023-09-12 |
| 发明（设计）人： | 闵普庆;朴劲玟;金炫娥;比特纳·梁;黄琉炅;金孝珍 | 申请（专利权）人： | GC细胞治疗 |
| 主分类号： | C12N5/0783 | 分类号： | C12N5/0783 |
| 代理公司： | 上海一平知识产权代理有限公司 31266 | 代理人： | 肖艳;徐迅 |
| 地址： | 韩国*** | 国省代码： | 暂无信息 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 使用 转化 细胞培养 自然 杀伤 细胞 方法 | ||
1.一种基因修饰的CD4+ T细胞，其特征在于，共表达4-1BBL基因和mbIL-21基因。
2. 如权利要求1所述的基因修饰的CD4+ T细胞，其中，所述的4-1BBL基因具有编码SEQID NO： 1所示氨基酸序列的核苷酸序列。
3. 如权利要求2所述的基因修饰的CD4+ T细胞，其中，所述的编码SEQ ID NO： 1所示氨基酸序列的核苷酸序列是SEQ ID NO： 2所示的核苷酸序列。
4. 如权利要求1所述的基因修饰的CD4+ T细胞，其中，所述的mbIL-21基因具有编码SEQ ID NO： 3所示氨基酸序列的核苷酸序列。
5. 如权利要求1所述的基因修饰的CD4+ T细胞，其中，所述所述基因修饰的CD4+ T细胞还表达至少一种选自下组的基因：OX40L基因和mTNF-α基因。
6. 如权利要求5所述的基因修饰的CD4+ T细胞，其中，所述的OX40L基因具有编码SEQID NO： 5所示氨基酸序列的核苷酸序列。
7. 如权利要求6所述的基因修饰的CD4+ T细胞，其中，所述的编码SEQ ID NO： 5所示氨基酸序列的核苷酸序列是SEQ ID NO： 6所示的核苷酸序列。
8. 如权利要求5所述的基因修饰的CD4+ T细胞，其中，所述的mTNF-α基因具有编码SEQID NO： 8所示氨基酸序列的核苷酸序列。
9. 如权利要求8所述的基因修饰的CD4+ T细胞，其中，所述的编码SEQ ID NO： 8所示氨基酸序列的核苷酸序列是SEQ ID NO： 9所示的核苷酸序列。
10. 如权利要求1所述的基因修饰的CD4+ T细胞，其中，所述基因通过重组慢病毒进行转导。
11. 如权利要求5所述的基因修饰的CD4+ T细胞，其中，所述的CD4+ T细胞表达4-1BBL基因、mbIL-21基因和mTNF-α基因。
12. 如权利要求5所述的基因修饰的CD4+ T细胞，其中，所述的CD4+ T细胞表达4-1BBL基因、mbIL-21基因、OX40L基因和mTNF-α基因。
13. 如权利要求1所述的基因修饰的CD4+ T细胞，其中，所述的CD4+ T细胞为选自下组的任一种：Hut78、H9、Jurkat、Loucy、Molt-3、Molt-13、PEER、RPMI8402和TALL-01细胞。
14.一种自然杀伤细胞的培养方法，其特征在于，包括：
将权利要求1所述的基因修饰的CD4+ T细胞与种子细胞共培养。
15.如权利要求14所述的培养方法，其中，所述种子细胞为选自下组的任一种：外周血、外周血单核细胞、外周血白细胞、富集的自然杀伤细胞和分离的自然杀伤细胞。
16.如权利要求14所述的培养方法，其中，所述的种子细胞是去除了CD3(+)细胞的细胞。
17. 如权利要求14所述的培养方法，其中，所述的基因修饰的CD4+ T细胞与所述的种子细胞以0.1∶1至50∶1的比例混合进行培养。
18.如权利要求14所述的培养方法，其中，将所述种子细胞与饲养细胞混合一次，并进行5天至60天的培养，或者将所述种子细胞与饲养细胞混合两次或更多次，并进行60天或更长时间的培养。
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