[发明专利]用于治疗性核酸递送的跨界平台

权利要求书

1.一种包含原核载体的非致病性细菌，所述载体包含编码一个或多个治疗性核酸的DNA分子和控制所述治疗性核酸的转录的原核启动子，其中所述细菌被工程化以表现出减少的治疗性核酸降解表型，以增加所述治疗性核酸的预期效果或活性的稳定性、幅度或持续时间。

2.根据权利要求1所述的非致病性细菌，其中所述治疗性核酸是选自以下的核酸：小干扰RNA/短发夹RNA(siRNA/shRNA)、微小RNA(miRNA)、miRNA拮抗剂、RNA或DNA适体、信使RNA(mRNA)、剪接转换寡核苷酸、反义寡核苷酸、抗原寡核苷酸、脱氧核酶、RNA诱饵、核酶、肽核酸、寡聚物和缺损干扰颗粒。

3.根据权利要求1所述的非致病性细菌，其中所述细菌被工程化以表达dsRNA结合蛋白(dsRBP)或一个或多个dsRBP的结合结构域或片段。

4.根据权利要求3所述的非致病性细菌，其中在产生治疗性核酸的质粒上编码所述dsRBP或dsRBP的一个或多个结合结构域或片段。

5.根据权利要求3所述的非致病性细菌，其中所述细菌被工程化以表达选自以下的蛋白质的dsRBP结合结构域：TAR RNA结合蛋白(TRBP)、核因子90(NF90)、ZNF346、SID-1和Ku70及其组合。

6.根据权利要求1所述的非致病性细菌，其中所述细菌被工程化以表现出降低的RNase活性。

7.根据权利要求6所述的非致病性细菌，其中所述细菌是缺乏功能性rnr基因的工程化细菌。

8.根据权利要求6所述的非致病性细菌，其中在所述细菌中缺失或下调了编码选自由RNase E、RNase I、RNase H和RNase J组成的组的蛋白质的基因。

9.根据权利要求1所述的非致病性细菌，其中所述细菌被工程化以表达使治疗性核酸的3'末端核苷酸甲基化的产物。

10.根据权利要求9所述的非致病性细菌，其中所述细菌被工程化以表达HEN1蛋白或其活性甲基转移酶片段或结构域。

11.根据权利要求9所述的非致病性细菌，其中所述HEN1蛋白或其活性甲基转移酶片段或结构域是热纤梭菌(C.thermocellum)HEN1的C末端甲基化酶结构域。

12.根据权利要求1所述的非致病性细菌，其中所述细菌是选自由以下组成的细菌组的工程化细菌：李斯特氏菌属(Listeria)、耶尔森氏菌属(Yersinia)、立克次氏体属(Rickettsia)、志贺氏菌属(Shigella)、大肠杆菌(E.coli)、沙门氏菌属(Salmonella)、军团菌属(Legionella)、衣原体(Chlamydia)、布鲁氏菌属(Brucella)、奈瑟菌属(Neisseria)、伯克氏菌属(Burkolderia)、博德特氏菌属(Bordetella)、疏螺旋体属(Borrelia)、柯克斯氏体属(Coxiella)、分枝杆菌属(Mycobacterium)、螺杆菌属(Helicobacter)、葡萄球菌属(Staphylococcus)、链球菌属(Streptococcus)、卟啉单胞菌属(Porphyromonas)、弧菌属(Vibrio)、密螺旋体属(Treponema)、乳杆菌属(Lactobacillus)和双歧杆菌属(Bifidobacteriae)。

13.一种包含原核载体的非致病性细菌，所述载体包含编码一个或多个治疗性核酸的DNA分子和控制所述治疗性核酸的转录的原核启动子，其中所述治疗性核酸干扰一个或多个靶分子并且其中所述细菌被工程化以表达结合靶细胞上的唾液酸残基的蛋白质。