[发明专利]针对家禽坏死性肠炎的疫苗

说明书

一种免疫原性多肽适用于制备供治疗或预防家禽小肠坏死用的疫苗，所述免疫原性多肽选自经分离的产气荚膜梭菌菌毛多肽、所述菌毛多肽的变异体；所述菌毛多肽的片段；和所述变异体的片段。所述经分离的产气荚膜梭菌菌毛多肽包括组装的菌毛或菌毛亚单元CnaA、FimA和/或FimB。

背景技术

本申请案涉及适用于制备针对家禽坏死性肠炎的疫苗的多肽。更具体地说，本申请涉及一种产气荚膜梭菌菌毛多肽，其适用于制备针对与家禽的产气荚膜梭菌感染有关的坏死性肠炎的疫苗。

坏死性肠炎是家禽(例如肉用仔鸡)的一种肠疾病，估计2015年其使家禽产业损失花费$US 60亿。坏死性肠炎主要由产气荚膜梭菌的某些A型菌株引起，所述A型菌株产生NetB成孔毒素，其过度生长且粘附于肠粘膜，最终产生疾病的特征性损伤。产气荚膜梭菌是肠道的正常习居菌，并且典型地，只有携载NetB毒素的那些菌株才能够引起坏死性肠炎。坏死性肠炎主要通过投与饲料内的抗生素来控制，这种做法因抗微生物抗性的潜在扩散而越来越不受欢迎，并且有些国家当前正逐步停止生产饲料内的抗生素。因此，从财务和公共健康的视角来看，重要的是找到控制坏死性肠炎的替代方法，例如疫苗的研发。

最近已通过产气荚膜梭菌粘附基因座与NetB阳性菌株的关系鉴定出产气荚膜梭菌粘附基因座(VR-10B)(乐普D(Lepp D)，龚J(Gong J)，松尔JG(Songer JG)，伯尔宁P(Boerlin P)，帕莱拉VR(Parreira VR)，普瑞斯考JF(Prescott JF.)，2013，携载netB质粒的家禽产气荚膜梭菌分离株中的附属基因组区域的鉴定(Identification of AccessoryGenome Regions in Poultry Clostridium perfringens Isolates Carrying the netBPlasmid)，细菌学杂志(Journal of Bacteriology)195:1152-1166)。在所检查的54种家禽分离株中，发现87％的netB阳性分离株和42％的netB阴性分离株存在经鉴定的基因座。这种基因座(后来重新命名为胶原蛋白粘附(CA)基因座)后来显示与胶原蛋白结合有关，并且是坏死性肠炎发病机理所必需的(韦德B(Wade B)，凯伯恩AL(Keyburn AL)，哈瑞恩V(Haring V)，福特M(Ford M)，路德JI(Rood JI)，穆尔RJ(Moore RJ)：产气荚膜梭菌菌株的粘附能力是禽类坏死性肠炎发病机理的关键(The adherent abilities of Clostridiumperfringens strains are critical for the pathogenesis of avian necroticenteritis)，兽医微生物学(Vet Microbiol)2016,197:53-61；韦德B，凯伯恩AL，希曼T(Seemann T)，路德JI，穆尔RJ：产气荚膜梭菌对胶原蛋白的结合与引起鸡发生坏死性肠炎的能力相关(Binding of Clostridium perfringens to collagen correlates with theability to cause necrotic enteritis in chickens)，兽医微生物学2015,180:299-303)。

多种产气荚膜梭菌蛋白质此前已作为候选疫苗加以评估。然而，这些蛋白质对坏死性肠炎最多提供部分的防护作用。另外，这些蛋白质中有许多对引起坏死性肠炎的菌株无特异性，并且不知道能否对坏死性肠炎发病机理起作用。因此，希望鉴定出替代的产气荚膜梭菌多肽，其可以作为用于生产针对坏死性肠炎的疫苗的候选物。

发明内容

本发明的一个方面提供一种经分离的产气荚膜梭菌菌毛多肽。在另一个方面中，本发明提供一种免疫原性多肽，其选自经分离的产气荚膜梭菌菌毛多肽、菌毛多肽的变异体；菌毛多肽的片段；和所述变异体的片段，其中菌毛多肽、变异体、多肽的片段和变异体的片段在家禽中具有免疫原性。在至少一个实施例中，菌毛多肽是CnaA多肽。在至少一个实施例中，菌毛多肽是FimA多肽。在至少一个实施例中，菌毛多肽是FimB多肽。在至少一个实施例中，菌毛多肽是组装的菌毛。