[发明专利]工程化细菌和使用方法

权利要求书

1.一种向有需要的哺乳动物受试者递送治疗性多肽的方法，所述方法包括：

a)从供体受试者获得包含细菌细胞的微生物组样品；

b)从所述微生物组样品中分离细菌细胞，其中，所述细菌细胞来自供体受试者共生/原生的细菌菌株；

c)对分离的细菌细胞进行体外培养以产生基本上同质的分离和培养的细菌细胞群；

d)用与所述细菌和/或供体受试者异源的一种或多种多核苷酸转化所述细菌细胞群，其中，所述一种或多种多核苷酸编码一种或多种治疗性多肽；和

e)将至少一部分基本上同质且经转化的分离和培养的细菌细胞群施用至或使其被施用至接受受试者，其中，所施用的细菌细胞能够在哺乳动物受试者中或其上永久或长期定殖并表达所述一种或多种治疗性多肽。

2.如权利要求1所述的方法，其进一步包括确定和/或测量所施用的细菌细胞在所述哺乳动物受试者中或其上的定殖或存在的步骤。

3.如权利要求1至3中任一项所述的方法，其中，所述微生物组样品获自选自由以下组成的组的生物样品：身体排泄物(例如，粪便、唾液、粘液、尿液或呼出物)，表面(例如，胃肠道、口腔、咽、鼻腔、泌尿生殖道、皮肤、肛门/直肠、阴道或眼)的活检或拭子，和病理标本(例如，癌组织、截肢肢体或发炎器官)。

4.如权利要求1至3中任一项所述的方法，其中，所述细菌细胞不包含编码致病毒素的多核苷酸。

5.如权利要求4所述的方法，其中，所述细菌细胞不包含编码一种或多种致病毒素的一种或多种多核苷酸，所述毒素选自由以下组成的组：AB毒素、α毒素、炭疽毒素、肉毒杆菌毒素、蜡样芽孢杆菌毒素、胆固醇依赖性溶血素、梭菌细胞毒素家族、肉毒梭菌C3毒素、艰难梭菌毒素A、艰难梭菌毒素B、梭菌肠毒素、产气荚膜梭菌α毒素、产气荚膜梭菌β毒素、Cry1Ac、Cry6Aa、Cry34Ab1、δ内毒素、白喉毒素、肠毒素、B型肠毒素、红细胞毒素、脱落素、脆性溶素、溶血素E、不耐热肠毒素、耐热肠毒素、溶血素、HrpZ家族、杀白细胞素、李斯特菌溶血素O、Panton–Valentine杀白细胞素、完整毒力岛、酚可溶性调节肽、肺炎球菌溶血素、成孔毒素、假单胞菌外毒素、绿脓菌素、抗真核Rhs毒素、RTX毒素、志贺毒素、志贺样毒素、金黄色葡萄球菌α毒素、金黄色葡萄球菌β毒素、金黄色葡萄球菌δ毒素、链球菌溶血素、破伤风菌溶血素、破伤风痉挛毒素、中毒性休克综合征毒素、气管细胞毒素和/或vero细胞毒素。

6.如权利要求1至5中任一项所述的方法，其中，所述细菌细胞对用于选择经转化的细菌细胞的一种或多种抗生素剂具有抗生素敏感性，所述抗生素剂为例如卡那霉素、氯霉素、羧苄西林、潮霉素和/或甲氧苄啶。

7.如权利要求1至6中任一项所述的方法，其中，所述细菌细胞对一种或多种临床使用的抗生素剂不具有抗生素抗性。