[发明专利]用于检测乙型肝炎病毒(HBV)的测定

权利要求书

1.一种用于扩增和检测样品中的人乙型肝炎病毒(HBV)核酸序列的寡核苷酸序列组，包含：

(a)包含SEQ ID NO:1的正向引物寡核苷酸序列；

(b)包含SEQ ID NO:2的反向引物寡核苷酸序列；

(c)包含SEQ ID NO:3的第一探针寡核苷酸序列；和

(d)包含SEQ ID NO:4的第二探针寡核苷酸序列，其中所述第一探针寡核苷酸序列和第二探针寡核苷酸序列中的每一种包含可检测标记。

2.如权利要求1所述的组，其进一步包含：

(e)包含SEQ ID NO:5的内部对照正向引物寡核苷酸序列；

(f)包含SEQ ID NO:6的内部对照反向引物寡核苷酸序列；和

(g)包含SEQ ID NO:7和可检测标记的内部对照探针寡核苷酸序列。

3.如权利要求1或权利要求2所述的组，其中所述可检测标记是荧光团。

4.如权利要求1-3中任一项所述的组，其中所述探针寡核苷酸中的每一种进一步包含淬灭剂部分。

5.一种用于检测疑似含有HBV的样品中的人乙型肝炎病毒(HBV)的方法，包括：

(a)使获自人的样品与如权利要求1-4中任一项所述的寡核苷酸序列组和用于扩增和检测核酸序列的试剂接触，

(b)扩增在所述样品中存在的第一靶标HBV核酸序列，

(c)使所述第一寡核苷酸探针和第二寡核苷酸探针与所述第一靶标HBV核酸序列杂交，

(d)通过评估来自所述可检测标记中的每一种的信号检测所述第一探针寡核苷酸序列和第二探针寡核苷酸序列与所述第一靶标HBV核酸序列的杂交，借此

(i)所述信号的存在指示所述第一探针寡核苷酸序列和第二探针寡核苷酸序列与所述第一靶标HBV核酸序列的杂交以及在所述样品中存在HBV，并且

(ii)所述信号的不存在指示所述样品中不存在HBV。

6.如权利要求5所述的方法，其中所述第一靶标HBV核酸序列包含HBV表面抗原基因的至少一部分。

7.如权利要求5或权利要求6所述的方法，其中所述样品包含血清或血浆。

8.一种用于检测样品中的人乙型肝炎病毒(HBV)的试剂盒，包含：

(a)包含SEQ ID NO:1的正向引物寡核苷酸序列；

(b)包含SEQ ID NO:2的反向引物寡核苷酸序列；

(c)包含SEQ ID NO:3的第一探针寡核苷酸序列；

(d)包含SEQ ID NO:4的第二探针寡核苷酸序列；

(e)用于扩增和检测核酸序列的试剂；和

(f)使用说明书，

其中所述第一探针寡核苷酸序列和第二探针寡核苷酸序列中的每一种包含可检测标记。

9.如权利要求8所述的试剂盒，其进一步包含：

(g)包含SEQ ID NO:5的内部对照正向引物寡核苷酸序列；

(h)包含SEQ ID NO:6的内部对照反向引物寡核苷酸序列；和

(i)包含SEQ ID NO:7和可检测标记的内部对照探针寡核苷酸序列。

10.如权利要求8或权利要求9所述的试剂盒，其中所述引物、探针和试剂是冻干的。

11.一种用于扩增和检测样品中的人乙型肝炎病毒(HBV)的组合物，包含：

(a)包含SEQ ID NO:1的正向引物寡核苷酸序列；

(b)包含SEQ ID NO:2的反向引物寡核苷酸序列；

(c)包含SEQ ID NO:3的第一探针寡核苷酸序列；和

(d)包含SEQ ID NO:4的第二探针寡核苷酸序列，其中所述第一探针寡核苷酸序列和第二探针寡核苷酸序列中的每一种包含可检测标记。