[发明专利]缀合度受控的生物缀合物、其制备方法及制备其的试剂

权利要求书

1.一种式(D-n)的区域异构DAR特异性蛋白质缀合物的混合物：

蛋白质-(G)_n

(D-n)

其中，

n表示总缀合度(DoC)，并且为1至8的整数；

蛋白质是天然蛋白质或合成蛋白质或其片段；

(G)指在相同或不同的连接位点接枝到蛋白质上的相同或不同的缀合物片段，

条件是每个片段(G)具有各自的为1至8的缀合度i，其中∑(i)＝n

并且其中，每个片段(G)具有下式：

-Y-(Z₁)_p-P-(Z₃)_s-F

(G)

条件是每个(G)的Y、Z₁、P、Z₃、F、n、p和s各自相同或不同，并且在n大于1的情况下，(D-n)中的(G)片段可以相同或不同

所述混合物的特征在于，对于给定的缀合物片段(G)：

-存在限定的各自的缀合度(DoC)i；

-所述混合物包含具有所述片段(G)的缀合物，使得至少90％的所述缀合物具有限定的各自的DoC i；

p和s独立地为0或1；

Z₁和Z₃是独立地选自由以下组成的组中的任选的间隔单元：C6-C12亚芳基；直链或支链的饱和或不饱和的C₁-C₆₀亚烷基，其任选地被选自-O-、-S-、-S(O)-、-SO2-、-O-P(O)(OH)-O-、-C(O)-、-NH-、-C(O)NH-、-NHC(O)-、-C(O)NR₄-、-NR₄C(O)-、杂亚芳基、亚芳基、单环或双环(C3-C10)亚环烷基、糖基、-O-(CH₂-CH₂-O-)_r-、-NH-(CH₂-CH₂-O-)_r-、-(-O-CH₂-CH₂-)_r或-(CH₂-CH₂-O-)_r-基团中的一个或多个化学基团中断和/或终止；和氨基酸或肽残基，其中环可以任选地是稠合的；

其中r为1至24的整数，并且

其中R₄是选自由C1-C6亚烷基组成的组中的溶解单元，其中一个或多个H被以下片段中的任一个取代：

P是由两个互补的转标记官能团T和C反应产生的转标记单元，P优选选自：

F是选自诸如抗肿瘤剂的药物；寡核苷酸；或检测剂的功能剂；

X是H或卤素原子(F、Cl、Br、I)；

Y是在水性条件下由R与蛋白质中存在的氨基酸残基反应生成的化学残基，优选选自由以下组成的组：

2.权利要求1所述的蛋白质缀合物(D-n)的混合物，其中，所述混合物包含DoC为1的具有式(D-1)的蛋白质缀合物：

蛋白质-Y-(Z₁)_p-P-(Z₃)_s-F

(D-1)

其中，蛋白质、Y、Z₁、P、Z₃、F、p和s如权利要求1所定义，并且其中，所述缀合物具有式(G)的缀合物片段：

Y-(Z₁)_p-P-(Z₃)_s-F

(G)

并且包含至少90％的缀合物(D-1)，所述片段接枝在蛋白质的相同或不同的连接位点上。

3.权利要求1或2所述的蛋白质缀合物(D-n)的混合物，其中，所述药物选自细胞毒性药物和抗肿瘤剂。

4.权利要求1至3中任一项所述的式(D-n)的蛋白质缀合物的混合物，其中，所述蛋白质是单克隆抗体。