[发明专利]试样观察装置和试样观察方法

说明书

试样观察装置(1)包括：保持被第一荧光物质染色的试样(S)和包含第二荧光物质的溶液(W)的试样容器(2)；照射第一激发光(L1)和第二激发光(L2)的照射部(11)；在一个方向上扫描试样容器(2)的扫描部(12)；将来自试样(S)的第一荧光(J1)和来自溶液(W)的第二荧光(J2)成像的成像部(17)；输出基于第一荧光(J1)的第一图像数据(G1)和基于第二荧光(J2)的第二图像数据(G2)的拍摄部(13)；生成基于多个第一图像数据(G1)的第一荧光图像(F1)和基于多个第二图像数据(G2)的第二荧光图像(F2)的图像处理部(32)；和基于第二荧光图像(F2)确定试样(S)的存在区域(N4)，设定第一荧光图像(F1)中的解析区域(N5)的解析部(33)。

技术领域

本发明涉及试样观察装置和试样观察方法。

背景技术

作为观察细胞等试样的技术，例如具有非专利文献1所记载的方法。该现有的方法中，用荧光物质将细胞核染色，基于激发荧光物质而得到的荧光图像确定细胞核的位置。然后，基于确定的细胞核的位置推测试样的存在区域，设定解析区域。

现有技术文献

非专利文献

非专利文献1：Perkin Elmer APPLICATION NOTE,“Image-based Quantificationof Apoptosisusing the Operetta”

发明内容

发明所要解决的课题

上述的现有的方法中，仅是基于细胞核的位置推测试样的存在区域，难以说确定解析区域的精度充分。为了基于荧光强度高精度地实施试样的分析，需要能够以充分的精度确定解析区域的技术。

本发明是为了解决上述课题而研发的，其目的在于，提供能够以充分的精度确定解析区域的试样观察装置和试样观察方法。

用于解决课题的方案

本发明的一个方面提供一种使用荧光观察试样的试样观察装置，其包括：试样容器，其将被第一荧光物质染色的试样保持于注入有包含第二荧光物质的溶液的孔内；照射部，其向孔照射激发第一荧光物质的第一激发光和激发第二荧光物质的第二激发光；扫描部，其在与第一激发光和第二激发光的光轴交叉的一个方向上相对地扫描试样容器；成像部，其将因第一激发光而在试样产生的第一荧光和因第二激发光而在溶液产生的第二荧光分别成像；拍摄部，其拍摄由成像部成像的第一荧光的光像的至少一部分而输出第一图像数据，且拍摄由成像部成像的第二荧光的光像的至少一部分而输出第二图像数据；图像处理部，其基于对于一个方向所得到的多个第一图像数据生成第一荧光图像，且基于对于一个方向所得到的多个第二图像数据生成第二荧光图像；和解析部，其基于第二荧光图像确定试样的存在区域，基于试样的存在区域设定第一荧光图像中的解析区域，解析解析区域中的荧光的强度。

该试样观察装置中，基于来自将试样染色的第一荧光物质的第一荧光生成第一荧光图像，并基于来自包含于溶液的第二荧光物质的第二荧光生成第二荧光图像。利用该第二荧光图像能够掌握试样的存在区域。因此，基于第二荧光图像确定试样的存在区域，且基于该存在区域设定第一荧光图像的解析区域，由此，能够基于第一荧光图像的解析区域的荧光强度，高精度地实施试样的分析。

另外，也可以是，成像部具有切换部，该切换部在成像光路上切换使第一荧光透过的第一荧光滤光片和使第二荧光透过的第二荧光滤光片。此时，能够通过简单的结构实现第一荧光与第二荧光的分割。

另外，也可以是，成像部具有分割第一荧光与第二荧光的光分割元件，拍摄部具有：拍摄由光分割元件分割后的第一荧光的至少一部分的第一光检测器；和拍摄由光分割元件分割后的第二荧光的至少一部分的第二光检测器。此时，能够通过简单的结构实现第一荧光与第二荧光的分割。