[发明专利]增强型代谢物生产酵母

权利要求书

1.一种重组酵母，在其基因组中：

(A)(i)至少一种编码苹果酸脱氢酶的核酸过表达和/或处于诱导型或抑制型启动子的控制之下，并且

(ii)至少一种、优选所有编码苹果酸脱氢酶的核酸不包含其过氧化物酶体靶向序列；

(B)至少一种编码NADP依赖性苹果酸酶的核酸过表达和/或处于诱导型或抑制型启动子的控制之下；

(C)(i)至少一种编码将磷酸烯醇丙酮酸转化为草酰乙酸的磷酸烯醇丙酮酸羧化酶的核酸过表达和/或处于诱导型或抑制型启动子的控制之下；和/或

(ii)至少一种编码将磷酸烯醇丙酮酸转化为草酰乙酸的磷酸烯醇丙酮酸羧激酶的核酸过表达和/或处于诱导型或抑制型启动子的控制之下；

(D)至少一种编码乙醛辅酶A脱氢酶的核酸过表达和/或处于诱导型或抑制型启动子的控制之下；并且

(E)(i)至少一种、优选所有编码丙酮酸激酶1的核酸已被删除，和/或

(ii)至少一种、优选所有编码丙酮酸激酶1的核酸独立地处于诱导型或抑制型启动子的控制之下、处于弱启动子的控制之下和/或处于不稳定的形式。

2.根据权利要求1所述的重组酵母，在其基因组中：

(i)至少一种、优选所有编码丙酮酸激酶2的核酸已被删除，和/或

(ii)至少一种、优选所有编码丙酮酸激酶2的核酸处于诱导型或抑制型启动子的控制之下和/或处于不稳定的形式。

3.根据权利要求1或2所述的重组酵母，在其基因组中：

(i)至少一种、优选所有编码醇脱氢酶1的核酸已被删除，和/或

(Ii)至少一种、优选所有编码醇脱氢酶1的核酸处于诱导型或抑制型启动子的控制之下和/或处于不稳定的形式。

4.根据权利要求1至3中任一项所述的重组酵母，在其基因组中：

(A)(i)至少一种、优选所有编码丙酮酸羧化酶1的核酸已被删除，和/或

(ii)至少一种、优选所有编码丙酮酸羧化酶1的核酸处于诱导型或抑制型启动子的控制之下和/或处于不稳定的形式；

和/或

(B)(i)至少一种、优选所有编码丙酮酸羧化酶2的核酸已被删除，和/或

(ii)至少一种、优选所有编码丙酮酸羧化酶2的核酸处于诱导型或抑制型启动子的控制之下和/或处于不稳定的形式。

5.根据权利要求1至4中任一项所述的重组酵母，在其基因组中：

(A)(i)至少一种、优选所有编码醇脱氢酶3的核酸已被删除，和/或

(ii)至少一种、优选所有编码醇脱氢酶3的核酸处于诱导型或抑制型启动子的控制之下和/或处于不稳定的形式；

(B)(i)至少一种、优选所有编码醇脱氢酶4的核酸已被删除，和/或

(ii)至少一种、优选所有编码醇脱氢酶4的核酸处于诱导型或抑制型启动子的控制之下和/或处于不稳定的形式；

和/或

(C)(i)至少一种、优选所有编码醇脱氢酶5的核酸已被删除，和/或

(ii)至少一种、优选所有编码醇脱氢酶5的核酸处于诱导型或抑制型启动子的控制之下和/或处于不稳定的形式。

6.根据权利要求1至5中任一项所述的重组酵母，其中所述至少一种编码苹果酸脱氢酶的核酸是来自酵母的核酸，优选来自酿酒酵母的核酸。

7.根据权利要求1至6中任一项所述的重组酵母，其中所述编码NADP依赖性苹果酸酶的核酸独立地选自由以下组成的组：来自拟南芥、大肠杆菌、木立芦荟、黑曲霉、黄菊属物种、谷氨酸棒状杆菌、水稻、天蓝色链霉菌、褐家鼠、玉米和克氏锥虫的核酸，并且更优选地由拟南芥ME3.At基因或由大肠杆菌ME3.Ec基因编码，最优选地由拟南芥ME3.At基因编码。