[发明专利]生物样品中原位抗原修复的方法及其成像

权利要求书

1.一种对固定在样品支撑件(12)上的生物样品(1)进行原位温度诱导的抗原修复的方法，其特征在于，包括以下步骤：

a)提供固定在所述样品支撑件上的所述生物样品；

b)提供一微流体装置(8)，其包括微流腔室(40)、位于所述微流腔室的一端的至少一个流体入口(32)和位于所述微流腔室的另一端的至少一个流体出口(34)，所述微流体装置(8)被构造成引导在压力下从流体进料系统(10)供应的流体通过微流腔室(40)，其中，微流腔室的至少一个壁由样品支撑件构成并以与微流腔室(40)的第一壁(33)之间流体密封且可移除的方式，通过夹持结构(16)安装在密封件(42)上，其中，微流腔室的容积在2.5μL至200μL之间；

c)以流体密封的方式将所述微流腔室和所述样品支撑件安装在一起，所述样品(1)朝向微流腔室(40)的内部；

d)在高于大气压的压力下进行温度控制的抗原修复步骤S1，其中，所述步骤S1包括：

-在高于大气压的微流腔室中的压力P_chamber下，通过流体入口向微流腔室中注入表位暴露溶液；

-将微流腔室加热至孵育温度设定点T_AR，并且将微流腔室的温度维持在所述孵育温度设定点一段培养时间t_i；

-在冷却时间t_c内，将微流腔室冷却至低于所述孵育温度设定点并高于或等于室温的冷却温度，其中所述孵育温度设定值T_AR在60℃至200℃之间，微流腔室中的压力P_chamber大于1.5bar，孵育时间t_i为0.5-30分钟，并且冷却单元是一个冷却块，所述冷却块包括迷宫式的流体流动通道，以使冷却流体从中流过，以提供对样品支撑件的主动冷却。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述冷却时间t_c在1至30分钟之间。

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，在所述温度控制的抗原修复步骤S1中，孵育温度设定点T_AR在110℃至200℃之间。

4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，在所述温度控制的抗原修复步骤S1中，所述微流腔室中的压力P_chamer在2.5至5巴之间。

5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述孵育时间t_i在2至20分钟之间。

6.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述孵育时间t_i在2至15分钟之间。

7.一种通过循环多路复用对样品进行原位成像的方法，其特征在于，包括实施如权利要求1所述的方法的步骤，另外还包括以下步骤：

e)通过流体入口以1μl/s至100μl/s之间的流速依次将多种试剂注入微流腔室中，所述的试剂包括至少一种成像探针；

f)对由与所述至少一种成像探针反应的样品的组分发射的信号进行成像；

g)用不同的成像探针重复步骤(e)和(f)。