[发明专利]异源表达的启动子

权利要求书

1.一种重组核酸构建体，包含有效连接至一个或多个控制序列的多核苷酸，所述控制序列指导所述多核苷酸在宿主细胞中的表达，其中至少一个控制序列包含secA启动子序列或该secA启动子序列的功能片段或功能变体，并且其中所述启动子序列与所述多核苷酸异源，其中所述多核苷酸不包含报告基因。

2.根据权利要求1所述的核酸构建体，其中所述启动子序列包括共有序列

TKNTTTGGAAATN(8-12)RTRTGNTAWRATAWN(4-6)

并且其中紧随共有序列之后是转录起始位点。

3.根据权利要求1或2所述的核酸构建体，其中所述启动子序列

(a)与SEQ ID NO：9、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67或68具有至少70％的序列同一性；

(b)在高严格条件下与(i)包含SEQ ID NO：9、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67或68的多核苷酸，或(ii)(i)的全长互补体杂交；或

(c)是SEQ ID NO：9、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67或68的启动子序列的变体，其包含在一个或多个位置上的取代、缺失和/或插入，并且其中启动子序列的变体具有启动子活性。

4.根据权利要求1、2或3中任一项所述的核酸构建体，其中所述启动子序列来自芽孢杆菌属物种。

5.根据权利要求1所述的核酸构建体，其中所述启动子序列包含共有序列

TCAWTMNTGCTGYN(11-13)TTAATGRTAADATTYDTN(4-5)

并且其中紧随共有序列之后是转录起始位点。

6.根据权利要求1或权利要求5所述的核酸构建体，其中所述启动子序列

(a)与SEQ ID NO：69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97或98具有至少70％的序列同一性；

(b)在高严格条件下与(i)包含SEQ ID NO：69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97或98的多核苷酸，或(ii)(i)的全长互补体杂交；或

(c)是SEQ ID NO：69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97或98的启动子序列的变体，其包括在一个或多个位置的取代、缺失和/或插入，并且其中启动子序列的变体具有启动子活性。

7.根据权利要求1、5或6中任一项所述的核酸构建体，其中所述启动子序列来自肠杆菌科(Enterobacteria)物种。

8.根据前述权利要求中任一项所述的核酸构建体，其中所述一个或多个控制序列包含含有核糖体结合位点的5′UTR序列。

9.根据权利要求1所述的核酸构建体，其中所述启动子序列来自包含secA基因的操纵子，所述操纵子来自选自芽孢杆菌科(Bacillaceae)、乳杆菌科(Lactobacillaceae)、肠杆菌科(Enterobacteriaceae)、葡萄球菌科(Staphylococcaceae)、棒杆菌科(Corynebacteriaceae)、短杆菌科(Brevibacteriaceae)、假单胞菌科(Pseudomonadaceae)、链霉菌科(Streptomycetaceae)、醋酸杆菌科(Acetobacteraceae)和梭菌科(Clostridiaceae)的微生物。