[发明专利]用于提供细胞替代疗法的组合物和方法

权利要求书

1.一种三维(3D)细胞团，其包含具有成熟胰腺β细胞表型和功能的转分化的成体哺乳动物非胰腺β细胞以及支架，其中所述细胞的至少一个亚群附着于所述支架。

2.根据权利要求1所述的3D细胞团，其中所述支架选自：固体支架、水凝胶、细胞外基质、细胞外基质水凝胶、蛋白质水凝胶、肽水凝胶、聚合物水凝胶、木基纳米纤维素水凝胶、聚甘油癸二酸酯(PGS)或者其任意组合。

3.根据权利要求2所述的3D细胞团，其中所述PGS与物质交联。

4.根据权利要求3所述的3D细胞团，其中所述物质选自层粘连蛋白、纤维连接蛋白、纤维蛋白、I/III型胶原蛋白和弹性蛋白及其任意组合。

5.根据权利要求2所述的3D细胞团，其中所述支架包含多个微粒。

6.根据权利要求5所述的3D细胞团，其中所述支架包含PGS，且其中所述微粒直径在约1μm至约1mm的范围。

7.根据权利要求6所述的3D细胞团，其中所述微粒直径在约50μm至约500μm的范围。

8.根据权利要求1所述的3D细胞团，其中所述3D细胞团被封装剂封装。

9.根据权利要求8所述的3D细胞团，其中所述封装剂包含选自以下的材料：藻酸盐、硫酸纤维素、胶原蛋白、壳聚糖、明胶、琼脂糖、聚乙二醇(PEG)、聚-L-赖氨酸(PLL)、聚砜(PSU)、聚乙烯醇(PVA)、聚乳酸(PLA)、丙烯酸酯类以及低分子量硫酸葡聚糖(LMW-DS)，或者其任意衍生物，以及其任意组合。

10.根据权利要求1所述的3D细胞团，其中所述支架封装所述转分化的细胞。

11.根据权利要求1所述的3D细胞团，其中与作为单层细胞培养物培养的转分化的非胰腺β胰岛素生成细胞相比，所述转分化的细胞包含

(a)提高的葡萄糖调节的C肽分泌、提高的葡萄糖调节的胰岛素分泌、增加的胰岛素含量，或者其组合；或者

(b)增加的GCG表达、增加的NKX6.1表达或增加的PAX6表达，或者其任意组合；或者

(c)(a)和(b)的组合。

12.根据权利要求1所述的3D细胞团，其中所述转分化的细胞应答于高葡萄糖浓度而分泌至少20pm/h*10⁶个细胞的C肽。

13.根据权利要求1所述的3D细胞团，其中所述细胞通过异位表达转录因子转分化，并且其中与类似地通过异位表达胰腺转录因子转分化并作为单层细胞培养物培养的具有成熟胰腺β细胞表型的转分化的非胰腺β细胞相比，所述异位表达的胰腺转录因子的表达增加。

14.根据权利要求1所述的3D细胞团，其中所述成体哺乳动物非胰腺β细胞选自上皮细胞、内皮细胞、角质形成细胞、成纤维细胞、肌细胞、肝实质细胞、肝细胞、血细胞、干细胞或祖细胞、肝干细胞、神经干细胞、间充质干细胞、造血干细胞或祖细胞，或者其任意组合。

15.根据权利要求14所述的3D细胞团，其中所述干细胞或祖细胞是从选自以下的组织获得的：骨髓、脐带血、外周血、胎儿肝脏以及脂肪组织，或者其任意组合。

16.一种药物组合物，其包含三维(3D)细胞团，所述3D细胞团包含具有成熟胰腺β细胞表型和功能的转分化的成体哺乳动物非胰腺β细胞以及支架，其中所述细胞的至少一个亚群附着于所述支架。