[发明专利]细胞菌落挑取系统

说明书

本发明提供了包括如下方法和设备的系统：用于使能存活的单克隆菌落生长、在已证实其存活力之后将菌落识别为是单克隆的并且将它们挑取出来并放置到目标环境中。方法可以包括：将细胞以低密度铺板在孔中，在铺板之后不久的第一时间捕获示出细胞位置的孔的竖直间隔开的一系列图像，在较晚的第二时间捕获示出候选细胞菌落位置的同一孔的图像，基于第一组图像中的信息确定候选菌落是单克隆的可能性，以及基于该可能性，使用挑取头将候选菌落挑取出来，以转移到目标环境。

优先权申请的交叉引用

本申请根据美国35U.S.C.§119(e)要求2017年6月2日提交的美国临时申请No.62/514,747的优先权，出于所有目的，该美国临时申请的全部内容通过引用并入本文。

其它材料的交叉引用

出于所有目的，以下美国专利的全部内容通过引用并入本文：美国专利No.7,776,584。

背景技术

用于筛选和选择细胞菌落的自动化装置已在市场上销售了好几年。然而，目前的系统具有许多缺点。特别是，这些系统不适用于识别和挑取单克隆菌落(即，源自单个细胞的菌落)。不过，因为单克隆菌落中的细胞在基因上是相同的，所以这种菌落在研究和工业中都很重要。目前，使用多个步骤和仪器来产生单克隆菌落。例如，首先使用诸如荧光激活细胞分选法(FACS)等技术将单个细胞隔离。接下来，将这些单个细胞铺板(plate)于高密度多孔板中，优选地一个细胞铺板于一个孔(well)中。最后，细胞生长成菌落。这涉及大量试剂和大量多孔板的使用。此外，以该方式产生的细胞菌落的存活力很低。

发明内容

本公开提供了如下系统，包括方法和设备：用于使能存活的单克隆菌落生长、在已证实其存活力之后将菌落识别为是单克隆的并且将它们挑取出来并放置到目标环境中。方法可以包括：将细胞以低密度铺板在孔中，在铺板之后不久的第一时间捕获示出细胞位置的孔的竖直间隔开的一系列图像，在较晚的第二时间捕获示出候选细胞菌落位置的同一孔的图像，基于第一组图像中的信息确定候选菌落是单克隆的可能性，以及基于该可能性，使用挑取头将候选菌落挑取出来，以转移到目标环境。

附图说明

图1是描绘了用于识别和挑取单克隆细胞菌落的说明性方法中的示例性第零日步骤的流程图。

图2是描绘了用于识别和挑取单克隆细胞菌落的说明性方法中的示例性挑取日步骤的流程图。

图3是描绘了用于确认单克隆性(monoclonality)的示例性步骤的流程图，该步骤可结合图1和图2的方法执行，例如，作为图2中的步骤PD-S4的一部分。

图4是描绘了用于确认挑取单克隆菌落的示例性步骤的流程图，该步骤可结合图1和图2的方法执行，例如，作为图2中的步骤PD-S5的一部分。

图5是用于识别和挑取单克隆细胞菌落的示例性设备的高度示意性的图。

图6是图5的设备的一部分的更具体的示意图。

图7是图6的设备的等距视图。

具体实施方式