[发明专利]改造丝心蛋白在审
申请号: | 201880050901.8 | 申请日: | 2018-07-25 |
公开(公告)号: | CN111051334A | 公开(公告)日: | 2020-04-21 |
发明(设计)人: | 森田启介;安部佑之介;前川健久;小鹰浩一;菅原润一;沼田圭司 | 申请(专利权)人: | 丝芭博株式会社;国立研究开发法人理化学研究所 |
主分类号: | C07K14/435 | 分类号: | C07K14/435;C12N1/15;C12N1/19;C12N1/21;C12N5/10;C12N15/12;D01F4/02 |
代理公司: | 中原信达知识产权代理有限责任公司 11219 | 代理人: | 盛曼;金龙河 |
地址: | 日本*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 改造 蛋白 | ||
1.一种改造丝心蛋白,其为包含式1:[(A)n基序-REP]m或式2:[(A)n基序-REP]m-(A)n基序所表示的结构域序列的改造丝心蛋白,其中,
所述结构域序列具有与天然来源的丝心蛋白相比相当于使REP中的一个或两个以上谷氨酰胺残基缺失或者置换为其他氨基酸残基的、谷氨酰胺残基的含量降低的氨基酸序列,
式1和式2中,(A)n基序表示由4~27个氨基酸残基构成的氨基酸序列,并且(A)n基序中的丙氨酸残基数相对于总氨基酸残基数为80%以上,REP表示由10~200个氨基酸残基构成的氨基酸序列,m表示10~300的整数,两个以上存在的(A)n基序彼此可以为相同的氨基酸序列,也可以为不同的氨基酸序列,两个以上存在的REP彼此可以为相同的氨基酸序列,也可以为不同的氨基酸序列。
2.如权利要求1所述的改造丝心蛋白,其中,REP中包含GPGXX基序,GPGXX基序含有率为10%以上,其中,X表示除甘氨酸残基以外的氨基酸残基。
3.如权利要求1或2所述的改造丝心蛋白,其中,谷氨酰胺残基含有率为9%以下。
4.如权利要求1~3中任一项所述的改造丝心蛋白,其中,所述其他氨基酸残基为选自由异亮氨酸(I)、缬氨酸(V)、亮氨酸(L)、苯丙氨酸(F)、半胱氨酸(C)、甲硫氨酸(M)丙氨酸(A)、甘氨酸(G)、苏氨酸(T)、丝氨酸(S)、色氨酸(W)、酪氨酸(Y)、脯氨酸(P)和组氨酸(H)组成的组中的氨基酸残基。
5.如权利要求1~4中任一项所述的改造丝心蛋白,其中,REP的疏水度为-0.8以上。
6.如权利要求1~5中任一项所述的改造丝心蛋白,其具有与天然来源的丝心蛋白相比相当于进一步置换、缺失、插入和/或添加有一个或两个以上氨基酸残基的氨基酸序列。
7.如权利要求6所述的改造丝心蛋白,其中,所述天然来源的丝心蛋白为昆虫或蜘蛛类来源的丝心蛋白。
8.如权利要求7所述的改造丝心蛋白,其中,所述天然来源的丝心蛋白为蜘蛛类的大壶状腺丝蛋白(MaSp)或小壶状腺丝蛋白(MiSp)。
9.一种改造丝心蛋白,其包含序列号2、序列号3、序列号4、序列号5、序列号6、序列号16或序列号17所表示的氨基酸序列、或者与序列号2、序列号3、序列号4、序列号5、序列号6、序列号16或序列号17所表示的氨基酸序列具有90%以上的序列一致性的氨基酸序列。
10.如权利要求1~9中任一项所述的改造丝心蛋白,其中,进一步在N末端和C末端中的任意一个末端或两个末端包含标签序列。
11.如权利要求10所述的改造丝心蛋白,其中,所述标签序列包含序列号7所表示的氨基酸序列。
12.一种改造丝心蛋白,其包含序列号9、序列号10、序列号11、序列号12、序列号13、序列号19或序列号20所表示的氨基酸序列、或者与序列号9、序列号10、序列号11、序列号12、序列号13、序列号19或序列号20所表示的氨基酸序列具有90%以上的序列一致性的氨基酸序列。
13.一种核酸,其编码权利要求1~12中任一项所述的改造丝心蛋白。
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