[发明专利]用于脂肪营养不良的自体细胞疗法的人脂肪组织祖细胞

权利要求书

1.一种提供脂肪祖细胞群的方法，所述脂肪祖细胞群用于治疗患有与基因突变相关的脂肪营养不良的受试者，所述方法包括：

从患有与基因突变相关的脂肪营养不良的受试者获得包含第一脂肪细胞群的原代脂肪组织，和

(i)在蛋白质-凝胶基质中在促血管生成因子存在下培养原代脂肪组织以诱导第二细胞群的生长；

(ii)从所述第二群分离细胞以形成包含富集脂肪祖细胞群的第三细胞群；和

在足以使细胞增殖的条件下将所述脂肪祖细胞群保持足以使细胞增殖的时间，

从而提供用于治疗患有与基因突变相关的脂肪营养不良的患者的脂肪祖细胞群。

2.权利要求1所述的方法，其中所述第二细胞群进行酶消化以产生所述第三细胞群。

3.权利要求2所述的方法，其中所述第二细胞群进行分散酶消化。

4.权利要求1所述的方法，还包括将基因修饰的脂肪祖细胞与可注射水凝胶混合。

5.权利要求1所述的方法，其中从所述第二群分离细胞包括从所述第二群中分离CD45-CD29+CD34+CD24+CD144-细胞。

6.一种分离富集的脂肪祖细胞群，其通过权利要求1-5所述的方法制备。

7.权利要求6所述的分离富集的脂肪祖细胞群，其在可注射水凝胶中。

8.权利要求1所述的方法，还包括对所述第二细胞群或所述第三细胞群进行基因修饰以纠正基因突变，从而提供基因修饰的脂肪祖细胞群。

9.通过权利要求8所述的方法制备的分离富集的基因修饰的脂肪祖细胞群，其处于可注射水凝胶中。

10.权利要求1或5所述的方法，包括将所述脂肪祖细胞在足以使细胞分化为白色脂肪细胞的条件下保持培养足以使细胞分化为白色脂肪细胞的时间。

11.权利要求10所述的方法，其中所述白色脂肪细胞表达ADIPOQ、PLIN1和/或LEP。

12.权利要求10所述的方法，包括将所述脂肪祖细胞保持在可注射水凝胶中。

13.通过权利要求11或12所述的方法制备的分离富集的白色脂肪细胞群。

14.一种治疗患有脂肪营养不良的受试者的方法，所述方法包括对所述受试者施用权利要求6或7所述的分离富集的脂肪祖细胞群；权利要求9所述的分离富集的基因修饰的脂肪祖细胞群；或权利要求13所述的分离富集的白色脂肪细胞群。

15.权利要求14所述的方法，其中所述受试者具有CGL1或CGL2。

16.权利要求14或15所述的方法，其中所述第一细胞群获自于待治疗的受试者。

17.组合物，其包含权利要求6或7所述的分离富集的脂肪祖细胞群；权利要求9所述的分离富集的基因修饰的脂肪祖细胞群；或权利要求13所述的分离富集的白色脂肪细胞群，所述组合物用于治疗患有脂肪营养不良的受试者。

18.权利要求17所述用途的组合物，其中所述第一细胞群获自于待治疗的受试者。

19.权利要求17或18所述用途的组合物，其中所述受试者具有CGL1或CGL2。