[发明专利]纯化唾液酸化的低聚糖的方法在审

专利信息
申请号: 201880056397.2 申请日: 2018-08-29
公开(公告)号: CN111094311A 公开(公告)日: 2020-05-01
发明(设计)人: S·詹尼温;M·黑尔弗里希;B·恩格斯 申请(专利权)人: 詹尼温生物技术有限责任公司
主分类号: C07H1/08 分类号: C07H1/08;C07H3/06;A23L33/125
代理公司: 北京北翔知识产权代理有限公司 11285 代理人: 曲蕾;张广育
地址: 德国莱茵*** 国省代码: 暂无信息
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摘要:
搜索关键词: 纯化 唾液 酸化 聚糖 方法
【权利要求书】:

1.一种纯化通过微生物发酵或体外生物催化产生的唾液酸化的低聚糖的方法,所述方法包括以下步骤

i)从发酵液中分离生物质;

ii)从发酵液或反应混合物中去除阳离子;

iii)从发酵液或反应混合物中去除阴离子杂质;以及

iv)从发酵液或反应混合物中去除分子量低于待纯化的唾液酸化的低聚糖的分子量的化合物。

2.根据权利要求1所述的方法,还包括一个或多个选自以下的步骤

v)增加唾液酸化的低聚糖的浓度;

vi)去除不需要的低聚糖;

vii)去除着色剂;

viii)去除内毒素;

ix)灭菌;以及

x)将唾液酸化的低聚糖喷雾干燥或结晶。

3.根据权利要求1或2所述的方法,其中所述唾液酸化的低聚糖是唾液酸化的人乳低聚糖,优选选自3’-SL、6’-SL、LST-a、LST-b、LST-c、3-F-SL、DS-LNT和F-LST-b。

4.根据权利要求1至3中任一项所述的方法,其中从发酵液中去除生物质通过以下方式进行:对所述发酵液进行超滤,优选进行从所述发酵液中去除生物质和分子量≥500kDa的化合物的超滤,更优选进行从所述发酵液中去除生物质和分子量≥150kDa的化合物的超滤,且最优选进行从所述发酵液中去除生物质和分子量≥100kDa的化合物的超滤。

5.根据权利要求1至4中任一项所述的方法,其中从发酵液中去除阳离子通过阳离子交换色谱法进行。

6.根据权利要求1至5中任一项所述的方法,其中从发酵液中去除阴离子杂质通过阴离子交换色谱法进行。

7.根据权利要求1至6中任一项所述的方法,其中去除分子量低于待纯化的唾液酸化的低聚糖的分子量的化合物通过错流过滤进行。

8.根据权利要求1至7中任一项所述的方法,其中待纯化的唾液酸化的低聚糖的浓度通过纳滤或蒸发溶剂而增加。

9.根据权利要求1至87中任一项所述的方法,其中去除着色剂通过用活性炭处理含有所需的唾液酸化的低聚糖的发酵液/溶液来进行。

10.根据权利要求1至9中任一项所述的方法,其中去除内毒素通过将含有所需的低聚糖的溶液通过6kDa过滤器或3kDa过滤器进行过滤而进行。

11.根据权利要求1至10中任一项所述的方法,其中对溶液进行灭菌通过将所述溶液通过0.2μm过滤器进行过滤而进行。

12.根据权利要求1至11中任一项所述的方法,还包括SMB色谱法的步骤。

13.根据权利要求1至12中任一项所述的方法,还包括电渗析的步骤。

14.一种唾液酸化的低聚糖的制剂,其中所述唾液酸化的低聚糖已通过根据权利要求1至13中任一项所述的方法纯化。

15.根据权利要求14所述的制剂,其中所述唾液酸化的低聚糖以≥80重量%的纯度存在于制剂中。

16.根据权利要求14或15所述的制剂,其中所述制剂是流体或粉末,优选其中颗粒是无定形或结晶颗粒的粉末。

17.根据权利要求14至16中任一项所述的制剂用于制造营养组合物、优选婴儿配方物的用途。

18.一种包含至少一种唾液酸化的低聚糖的营养组合物,其中所述至少一种唾液酸化的低聚糖通过微生物发酵或生物催化产生,并且其中所述营养组合物是药物制剂、膳食补充剂、乳制饮料或婴儿配方物。

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