[发明专利]细胞保存材料

说明书

本发明的课题为提供将细胞或组织在非冷冻状态下、维持良好的存活性而进行保存的技术。在液体组合物中，在非冷冻状态下保存细胞或组织，所述液体组合物含有脱酰基结冷胶或其盐、及在二价金属阳离子介质中维持无规卷曲状态、且能介由二价金属离子进行交联的酸性多糖类或其盐。该酸性多糖类可以是海藻酸。该液体组合物可以还含有钙离子等金属阳离子。

技术领域

本发明涉及用于将细胞或组织在非冷冻状态下进行保存的液体组合物、及使用了该液体组合物的细胞或组织的保存方法。

背景技术

目前，在利用iPS细胞或间充质干细胞等干细胞的移植医疗研究中，细胞银行在大量制备干细胞的基础上，将其冷冻保存，各研究机构、医疗机构从该细胞银行的储备中以冷冻保存的状态获取所期望的干细胞，将其解冻·复苏，并根据需要而使其分化成所期望的细胞后，供于各种用途。然而，对于被寄予未来期望的细胞银行系统(其运作自体移植体制，管理并保管许多异体细胞的库存)而言，利用以细胞冷冻为前提的现有运输技术时，难以大量且稳定地供给处于适合移植状态的细胞。即，在移植时，需要将经冷冻保存的细胞解冻、培养并根据需要使其分化为目标细胞，并在此基础上，提供大量良好状态的细胞，但是，在必须以冷冻状态运输细胞的情况下，移植实施设施不得不从保存·管理细胞的细胞银行订购冷冻细胞，于该设施内自行大量培养。因此，实施移植的设施需要配备细胞的大量培养设备(例如，细胞处理中心(CPC))，而在不具有该设备的设施中，则难以实施移植医疗。另一方面，细胞银行通常具有大量培养细胞的技术、设备，因此，如果细胞银行侧能够在大量制备适于移植的良好状态的细胞的基础上、将得到的细胞维持在良好的状态，直到迅速供给至移植实施设施，则即使是不具有细胞的大量培养设备的设施，也能够实施移植医疗。为了解决该课题，不进行冷冻而将大量的细胞在维持为良好状态的情况下保存、运输的技术是不可或缺的。

脱酰基结冷胶(DAG)等多糖类介由金属阳离子(例如钙离子等二价金属阳离子)聚集而在水中形成三维网络(无定形的结构体)。在含有该三维网络的液体培养基中培养细胞时，培养基中的细胞被该三维网络捕获而不下沉，因此无需振荡、旋转操作等就能够以均匀分散的悬浮状态培养(悬浮静置培养)细胞。另外，能够在不实质性地提高液体培养基的粘度的情况下形成上述的三维网络，因此，含有该三维网络的培养基组合物在传代培养等的操作性方面也优异(专利文献1)。该可进行悬浮静置培养的培养基组合物具有增强各种细胞的增殖活性等各种优异的特性，因此能够期待在再生医疗、蛋白质等的大量生产等广泛的技术领域中应用。

专利文献2中，公开了将含有纳米纤维的培养基组合物用于细胞、组织的保存、运输。

现有技术文献

专利文献

专利文献1：国际公开第2014/017513号

专利文献2：国际公开第2015/111686号

发明内容

发明所要解决的课题

本发明的目的在于，提供将在非冷冻状态下、维持住细胞或组织的良好存活性而进行保存的技术。

用于解决课题的手段

本申请发明人为了解决上述课题进行了深入研究，结果发现，通过在含有脱酰基结冷胶及海藻酸的培养基组合物中悬浮，能够在室温、维持良好的存活性而长期保存细胞、组织。在该培养基组合物中保存球体(sphere)时，避免了球体彼此的凝集、抑制了球体内部的坏死的发生。该培养基组合物中，即使在所设想的运输时的环境的振动条件下，仍然能够在室温维持细胞良好的存活性而长期保存。基于这些见解，本申请的发明人进一步进行研究，从而完成了本发明。

即，本发明如下：

[1]液体组合物，其用于在非冷冻状态下保存细胞或组织，所述液体组合物含有脱酰基结冷胶或其盐、及在二价金属阳离子介质中维持无规卷曲状态、且能介由二价金属离子进行交联的酸性多糖类或其盐。