[发明专利]在酵母和植物细胞悬浮培养物中产生水溶性大麻素化合物和材料组合物

权利要求书

1.一种在酵母细胞悬浮培养物中产生水溶性大麻素的体内方法，包括以下步骤：

-建立表达编码与启动子可操作连接的异源糖基转移酶的核苷酸序列的基因修饰的酵母细胞的悬浮细胞培养物，其中所述异源糖基转移酶被配置为产生水溶性大麻素；

-将一种或多种大麻素引入所述基因修饰的酵母细胞的悬浮细胞培养物。

2.根据权利要求1所述的方法，其中所述基因修饰的酵母细胞包括选自以下的基因修饰的酵母细胞：基因修饰的毕赤酵母细胞、基因修饰的酿酒酵母细胞和/基因修饰的马克斯克鲁维酵母细胞。

3.根据权利要求1所述的方法，其中所述编码异源糖基转移酶的核苷酸序列包括来自烟草植物的异源糖基转移酶。

4.根据权利要求3所述的方法，其中所述来自烟草植物的异源糖基转移酶包括选自下列的来自烟草植物的异源糖基转移酶：NtGTl、NtGT2、NtGT3、NtGT4、和NtGT5、或所列糖基转移酶的同源物或直系同源物。

5.根据权利要求4所述的方法，其中所述来自烟草植物的异源糖基转移酶包括选自下列的来自烟草植物的异源糖基转移酶：SEQ ID NO.51、SEQ ID NO 53、SEQ ID NO.55、SEQID NO.57、和SEQ ID NO.59、或与所列序列至少80％同源的序列。

6.根据权利要求3所述的方法，其中所述来自烟草的异源糖基转移酶包括选自下列的来自烟草植物的异源糖基转移酶：SEQ ID NO.27、SEQ ID NO29、SEQ ID NO.31、SEQ IDNO.33、SEQ ID NO.35、SEQ ID NO.37、SEQ ID NO.39、或与所列序列中的任一种至少80％同源的序列。

7.根据权利要求1所述的方法，其中所述异源糖基转移酶包括来自甜叶菊和/或拟南芥的异源糖基转移酶。

8.根据权利要求7所述的方法，其中所述来自甜叶菊和/或拟南芥的异源糖基转移酶选自：UDP糖基转移酶76G1(UGT76G1)、或UGT76G1的同系物或直系同源物。

9.根据权利要求8所述的方法，其中所述来自甜叶菊和/或拟南芥的异源糖基转移酶选自：SEQ ID NO.7、和/或SEQ ID NO.61、或与所列序列至少80％同源的序列。

10.根据权利要求1所述的方法，并且还包括将至少一种糖苷酶抑制剂引入所述基因修饰的酵母细胞的悬浮细胞培养物的步骤。

11.根据权利要求10所述的方法，其中所述至少一种糖苷酶抑制剂包括选自下列的糖苷酶抑制剂：D,L-l,2-脱水-myo-肌醇(Conduritol B Epoxide(CBE))；6-Epicastanospermine(Castanospermine)；6-溴环己-4-烯-l,2,3-三醇(Bromoconduritol)；(+)-l-脱氧野尻霉素(脱氧野尻霉素)；1,5-二脱氧-1,5-亚氨基-D-山梨糖醇盐酸盐(1-脱氧野尻霉素盐酸盐)；lR,2S,3S,4R)-rel-5-环己烯-l,2,3,4-四醇(Conduritol B)；(3R,4R,5R)-5-(羟甲基)-3,4-哌啶二醇(2S,3S)-2,3-二羟基丁二酸酯(Isofagomine D-Tartrate)；0-(D-吡喃葡萄糖基)氨基N-苯基氨基甲酸酯和(3S,4S,5R,6R)-3,4,5-三羟基-6-(羟甲基)-2-哌啶酮(D-Manno-y-lactam)。

12.根据权利要求1所述的方法，并且还包括下列步骤：表达至少一种α因子分泌信号。

13.根据权利要求1所述的方法，并且还包括下列步骤：表达异源ABC转运蛋白。