[发明专利]视网膜组织的制备方法

权利要求书

1.抑制包含视细胞前体细胞和/或视细胞的神经视网膜组织中的神经节细胞、无长突细胞、水平细胞和/或双极细胞分化的方法，所述方法包括将包含神经视网膜祖细胞，且处于从神经节细胞刚出现后的分化阶段到视锥细胞前体细胞的出现率达到最大的分化阶段中的任一阶段的视网膜组织在包含甲状腺激素信号转导途径作用物质的培养基中培养的步骤。

2.根据权利要求1所述的方法，所述方法包括在包含甲状腺激素信号转导途径作用物质的培养基中培养到出现视杆细胞前体细胞和/或双极细胞的分化阶段。

3.根据权利要求1所述的方法，所述方法包括在包含甲状腺激素信号转导途径作用物质的培养基中培养到形成外丛状层的分化阶段。

4.根据权利要求1所述的方法，所述方法包括在包含甲状腺激素信号转导途径作用物质的培养基中培养到出现穆勒细胞的分化阶段。

5.根据权利要求1～4中任一项所述的抑制分化的方法，其中所述方法包括抑制PAX6阴性/CHX10强阳性细胞及PAX6阳性/CHX10阴性细胞的生成。

6.根据权利要求1～5中任一项所述的方法，其中，神经视网膜组织源自干细胞。

7.根据权利要求6所述的方法，其中，干细胞为多潜能干细胞。

8.根据权利要求6所述的方法，其中，干细胞为从发育成熟的视网膜得到的成体干细胞。

9.根据权利要求1～8中任一项所述的方法，其中，甲状腺激素信号转导途径作用物质为三碘甲状腺原氨酸。

10.根据权利要求9所述的方法，其中，三碘甲状腺原氨酸的浓度为1～100nM。

11.根据权利要求1～10中任一项所述的方法，其中，包含神经视网膜祖细胞，且处于神经节细胞刚出现后的分化阶段的视网膜组织，为相对于总细胞数而言神经视网膜祖细胞含有率为50％以上的视网膜组织。

12.根据权利要求1～11中任一项所述的方法，其中，培养方法为悬浮培养。

13.成熟的神经视网膜组织，或能成熟为成熟的神经视网膜组织的神经视网膜组织的制备方法，所述方法包括：

(1)将发育早期阶段的视网膜组织在培养基中培养，得到包含神经视网膜祖细胞，且处于从神经节细胞刚出现后的分化阶段到视锥细胞前体细胞的出现率达到最大的分化阶段中的任一阶段的视网膜组织的步骤；及

(2)将步骤(1)中得到的视网膜组织在包含甲状腺激素信号转导途径作用物质的培养基中培养的步骤。

14.根据权利要求13所述的制备方法，其中，步骤(1)中的培养基和/或步骤(2)中至少一部分的步骤中的培养基为包含抑制腹侧标记表达的程度的浓度的背侧化信号转导物质的培养基。

15.根据权利要求13或14所述的制备方法，其中，步骤(2)中的培养基包含抑制腹侧标记表达的程度的浓度的背侧化信号转导物质。

16.根据权利要求13～15中任一项所述的制备方法，其中，步骤(1)中的培养基包含抑制腹侧标记表达的程度的浓度的背侧化信号转导物质。