[发明专利]抗CKAP4单克隆抗体

说明书

本发明的目的在于提供一种阻碍DKK1与CKAP4的结合而发挥优异的抗肿瘤效果的抗CKAP4单克隆抗体。将序列号1所示的氨基酸序列(CKAP4的氨基酸序列)的451～455位的区域的至少一部分、481～485位的区域的至少一部分、502～510位的区域的至少一部分、503～524位的区域的至少一部分以及585～590位的区域的至少一部分、或者、585～592位的区域的至少一部分作为表位识别的抗CKAP4单克隆抗体有效阻碍DKK1与CKAP4的结合、S2‑CP8细胞的AKT的活化、S2‑CP8细胞的增殖能力或S2‑CP8细胞的转移能力，而发挥优异的抗肿瘤效果。此外，通过开发使用这些抗CKAP4单克隆抗体的ELISA法，例如，可测定胰腺癌患者的血清CKAP4，因此也有助于伴随诊断试剂的开发。

技术领域

本发明涉及阻碍DKK1与CKAP4的结合而发挥优异的抗肿瘤效果的抗CKAP4单克隆抗体。另外，本发明涉及利用该抗CKAP4单克隆抗体的抗肿瘤剂。此外，本发明涉及利用该抗CKAP4单克隆抗体的CKAP4的测定方法。

背景技术

报告了分泌蛋白质Dikkopf 1(DKK 1)已知作为Wnt信号抑制因子，其是在胎儿期使形态形成适当化的细胞增殖因子，在出生后，DKK 1抑制大肠癌细胞的增殖。另一方面，DKK 1在多发性骨髓瘤、肝母细胞瘤、肾母细胞瘤、前列腺癌、肾癌(ウィムス腫瘍)、乳腺癌、食道癌、肺癌等中过量表达，推测DKK1具有促进癌细胞的增殖的功能，但其机理尚不明确。

在这样的状况下，本发明人等对通过DKK1使细胞的增殖亢进的信号通路进行阐明(非专利文献1和专利文献1)。具体而言，由发明人等进行存在于细胞膜的DKK1结合蛋白质的全面解析，其结果确定细胞骨架相关蛋白4(CKAP4)作为DKK1的新型受体。此外，本发明人等阐明以下情况等(非专利文献1和专利文献1)：(1)通过DKK1与CKAP4结合，PI3K-AKT通路被活化，促进癌细胞的增殖；(2)DKK1和CKAP4这两个蛋白质在胰腺癌、肺癌和食道癌中以高频率在肿瘤部特异性过量表达，这两个蛋白质高表达的胰腺癌、肺癌和食道癌预后不良；(3)通过DKK1或CKAP4的表达抑制，DKK1和CKAP4这两个蛋白质高表达的胰腺癌细胞株、肺癌细胞株和食道癌细胞株中抑制AKT的活化，抑制小鼠皮下的肿瘤形成。此外，还报道了通过抗CKAP4多克隆抗体，可阻碍DKK1与CKAP4的结合而抑制小鼠皮下的胰腺癌细胞株、肺癌细胞株和食道癌细胞株的肿瘤形成(非专利文献1和专利文献1)。

如此，阐明CKAP4与癌细胞的增殖有关，并且以CKAP4为靶的分子靶向药物作为新的抗肿瘤剂受到关注。

现有技术文献

非专利文献

非专利文献1：Hirokazu Kimura et al.,J.Clin.Invest.,2016,126(7),p.2689-2705

专利文献

专利文献1：国际公开第2016/136372号

发明内容

(发明要解决的课题)

可阻碍DKK1与CKAP4的结合的抗CKAP4单克隆抗体作为以CKAP4为靶的分子靶向药物是有用的。另外，作为以CKAP4为靶的分子靶向药物使用的抗CKAP4单克隆抗体中，不仅与CKAP4结合，而且阻碍DKK1与CKAP4的结合，有效抑制癌细胞的增殖是重要的。然而，在现有技术中，为了阻碍DKK1与CKAP4的结合而有效抑制癌细胞的增殖，对于可与CKAP4的哪个区域结合的单克隆抗体是有效的尚不明确。

另外，为了进行以CKAP4为靶的分子靶向药物的开发、研究，癌症的发病机理的阐明、诊断等，还需要确立CKAP4的测定方法。

因此，本发明的目的之一在于提供一种阻碍DKK1与CKAP4的结合而发挥优异的抗肿瘤效果的抗CKAP4单克隆抗体。另外，本发明的另一目的在于提供CKAP4的测定方法。